[发明专利]一种定性定量检测食用菌中多种荧光增白剂DSD-FWAs的方法

说明书

本发明公开了一种定性定量检测食用菌中多种荧光增白剂DSD‑FWAs的方法，属于荧光增白剂DSD‑FWAs检测的技术领域，所述定性定量检测食用菌中多种荧光增白剂DSD‑FWAs的方法通过将超高效液相色谱、PDA检测器、FLD检测器联用，既可以提高检测的灵敏度，也能够实现准确定性，防止假阳性的产生和漏检。按仪器的3倍信噪比计算检出限(LOD)，10倍信噪比计算定量限(LOQ)，11种荧光增白剂标准品溶液的检出限：荧光检测器2.0～2.8ng/mL，二极管阵列检测器14～25ng/mL。11种荧光增白剂标准品溶液的定量限：荧光检测器6.7～9.3ng/mL，二极管阵列检测器47～83ng/mL。

技术领域

本发明属于荧光增白剂DSD-FWAs检测技术领域，具体涉及一种定性定量检测食用菌中多种荧光增白剂DSD-FWAs的方法。

背景技术

食用菌菇的食用、药用价值都非常高。食用菌具有提高机体抵御疾病的免疫功能，能够用于镇咳、稀化痰液和抗癌等。在当代社会，将食用菌菇作为日常菜肴的人群越来越多。但是由于培育的技术以及贮存问题，菌菇容易出现变色甚至腐烂现象。因此，荧光增白剂的非法使用在菌菇市场中迅速火热起来。

荧光增白剂与人体细胞内蛋白质结合，就会产生蓄积作用，很难通过正常代谢排出体外，如长期食用，在体内蓄积至一定量，会对体内重要内脏器官造成严重损害，此外还会引起体外细胞的遗传物质损伤，甚至有致癌的可能。有研究表明，通过食物或水的转移与人体直接接触时，如果荧光增白剂含量过高或者毒性过高时，会对健康产生潜在的危害。

目前荧光增白剂检测方法包括紫外灯观测法、白度法、紫外分光光度法、荧光分光光度法、薄层层析法、毛细管电泳法、高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法，但是紫外灯观测法虽操作简单，但只能对样品进行定性实验，不能准确定量，更不能鉴定荧光增白剂的品种；白度法受人为和设备的影响较大，且对于组成复杂的样品，测定结果的准确性难以保证；紫外分光光度法和荧光分光光度法需要严格控制检测时间，否则会导致试样受光照射发生顺反异构转换，并且这两种方法只能对样品物质的总量进行定量测定，而对于试样中荧光增白剂的具体添加品种和含量无法分析；薄层层析法操作复杂、难度大，对试样仅能进行半定量分析，且此法的精度、重复性与灵敏度偏低；毛细管电泳法对于基质成分复杂，目标化合物成分较小的产品，具有局限性；高效液相色谱法和液相色谱-串联质谱法常常出现保留时间偏移的现象。因此，现有检测荧光增白剂的技术存在检测效率低、检测结果不准确的技术问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测食用菌中多种荧光增白剂DSD-FWAs的方法，该方法能够实现多种荧光增白剂定性定量的定性定量检测、检测时间短，检测效果好。

本发明提供一种定性定量检测食用菌中多种荧光增白剂DSD-FWAs的方法，包括以下步骤：

S1.待测样品溶液制备；

S2.将所述待测样品溶液顺次经过超高效液相色谱分离、PDA检测器定性检测、FLD检测器定量检测，所述PDA检测器定性检测得到待测样品的保留时间，所述FLD检测器定量检测得到待测样品的峰面积值；

所述PDA检测器的检测波长为190～490nm；所述FLD检测器的激发波长为350nm，发射波长为430nm；

若所述待测样品溶液的保留时间与标准品溶液的保留时间一致，则确定待测样品是相应标准品溶液对应种类的荧光增白剂；

根据所述待测样品溶液FLD检测的峰面积值与预定的线性回归方程，获得待测样品溶液中荧光增白剂的浓度。

优选的，所述超高效液相色谱分离用色谱柱的规格为1.7μm,2.1mm×100mm的Waters ACQUITY UPLC BEH C18；流动相A为体积比为2:3的乙腈和甲醇的混合溶液，流动相B为体积比为5:95的四丁基溴化铵和甲醇的混合溶液；所述超高效液相色谱分离时的梯度洗脱程序为：