[发明专利]一种微生物发酵避免接种时染菌的系统及方法

权利要求书

1.一种微生物发酵避免接种时染菌的系统，其特征在于，包括接种瓶和发酵罐，其中：

所述接种瓶的瓶口内设置有橡胶塞，所述橡胶塞的中部设置有第一通孔，所述瓶口的外侧设置有压盖，所述压盖把所述橡胶塞压紧在所述瓶口内，所述压盖的中部设置有与所述第一通孔同心的第二通孔；

所述发酵罐包括罐体和设置在所述罐体上的密封盖，所述密封盖上设置有补料管，所述补料管上设置有补料阀，所述补料阀和密封盖之间设置有依次连接的第一短节和第二短节，所述第一短节和第二短节之间设置有接种阀，所述第二短节的末端套设有乳胶管，所述乳胶管的末端套设有不锈钢管制插头，所述不锈钢管制插头插设在所述第一通孔和第二通孔中，所述密封盖上还设置有放空阀。

2.根据权利要求1所述的微生物发酵避免接种时染菌的系统，其特征在于，所述接种瓶的瓶口和压盖之间为螺纹连接，所述瓶口上设置有外螺纹，所述压盖上设置有与所述外螺纹相匹配的内螺纹。

3.根据权利要求2所述的微生物发酵避免接种时染菌的系统，其特征在于，所述接种瓶为耐温150℃、耐压0.15MPa、容积5L的聚丙烯塑料瓶，所述第一通孔的直径为9.5mm，所述第二通孔的直径为10mm。

4.根据权利要求1所述的微生物发酵避免接种时染菌的系统，其特征在于，所述发酵罐为竖向设置，所述发酵罐的内部设置有搅拌装置，所述发酵罐的罐体上方设置有用于驱动所述搅拌装置的电机，所述搅拌装置的搅拌轴上设置有搅拌叶片。

5.根据权利要求4所述的微生物发酵避免接种时染菌的系统，其特征在于，所述发酵罐内设置有用于检测发酵罐内温度和湿度的温湿度传感器，所述温湿度传感器与系统的控制装置连接。

6.根据权利要求5所述的微生物发酵避免接种时染菌的系统，其特征在于，所述乳胶管为耐温150℃的乳胶管，所述不锈钢管制插头为直径10mm、长度100mm的末端具有锥度的不锈钢管制插头。

7.一种微生物发酵避免接种时染菌的方法，其特征在于，包括：

步骤1：接种瓶的空瓶灭菌：将所述接种瓶置于灭菌锅内，在一定的压力和温度下灭菌一定时间；

步骤2：摇瓶种子液集中倒入接种瓶内：预先对无菌室和超净平台用消毒液消毒、紫外线灭菌，经空瓶灭菌的接种瓶送到无菌室，在超净平台内打开接种瓶的压盖和橡胶塞，将摇瓶培养的种子液倒入接种瓶内，把橡胶塞塞入接种瓶瓶口内，用压盖将橡胶塞压紧，并用密封胶带封好，保证瓶口的密封不进气；

步骤3：接种瓶内的种子液转接到发酵罐内：待发酵罐实罐灭菌连同接种阀、乳胶管一起灭菌结束后，向发酵罐内通入无菌空气，保持发酵罐内一定正压，发酵罐的接种管插头穿透接种瓶的密封胶带插入接种瓶的压盖和橡胶塞内，并将接种瓶倒立，开启接种阀，罐内无菌空气进入接种瓶内，待发酵罐内压力与接种瓶压力平衡后，稍开放空阀，发酵罐内压力低于接种瓶内压力，种子液顺利流入罐内，由于橡胶塞的弹性，锁紧不锈钢管制插头，杜绝了外部空气进入接种瓶和发酵罐内，最后关闭接种阀，在保持罐内正压条件下完成接种。

8.根据权利要求7所述的微生物发酵避免接种时染菌的方法，其特征在于，所述步骤1中，接种瓶空瓶灭菌的压力为0.12MPa、温度为120℃、灭菌时间为30min。

9.根据权利要求7所述的微生物发酵避免接种时染菌的方法，其特征在于，所述步骤3中，保持发酵罐内的正压为50-60KPa，待温度降至38℃时开始接种，当稍开罐体放空阀时，罐内压力降至40KPa，接种瓶内的种子液在压差的驱动下全部流进发酵罐。

10.根据权利要求7所述的微生物发酵避免接种时染菌的方法，其特征在于，所述步骤3还包括发酵罐装入培养基后进行实罐灭菌，凡液面以上的所有阀门打开，包括：补料阀、接种阀、放空阀，与发酵罐内一同灭菌，罐内通入水蒸气，待罐内蒸汽压力升至0.115MPa、温度升至116-120℃时，保温保压25min后，关闭上述所有阀门，将进罐蒸汽切换为无菌空气。