[发明专利]纳米硒负载VP1基因siRNA及其制备方法与应用在审
| 申请号： | 201810419279.5 | 申请日： | 2018-05-04 |
| 公开（公告）号： | CN108841822A | 公开（公告）日： | 2018-11-20 |
| 发明（设计）人： | 朱冰;李英华;林正方 | 申请（专利权）人： | 广州市妇女儿童医疗中心 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;A61K31/713;A61K9/19;A61K47/02;A61P31/14 |
| 代理公司： | 广州市越秀区海心联合专利代理事务所(普通合伙) 44295 | 代理人： | 蔡国;马赟斋 |
| 地址： | 510000 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 纳米硒 制备方法和应用 基因位点 毛细血管 免疫系统 半衰期 核苷酸 靶标 粒径 血流 制备 避开 停留 应用 | ||
1.一种纳米硒负载VP1基因siRNA，其特征在于，所述siRNA干扰的基因位点为第157位核苷酸；
所述的siRNA序列为：
Sense 5’-ggcaucaucaaaugcuagutt-3’，
Antisense 5’-acuagcauuugaugaugcctt-3’。
2.一种如权利要求1所述的纳米硒负载VP1基因siRNA的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：将维生素C溶液与亚硒酸钠溶液于透析袋中混合，搅拌，置于水中进行透析，得纯化后纳米硒溶液；
步骤2：将所述的纳米硒溶液中，加入聚乙烯亚胺和siRNA，使二者终浓度分别为40μM和2.5nM，搅拌，离心弃上清，将沉淀冷冻干燥，即得。
3.根据权利要求2所述的纳米硒负载VP1基因siRNA的制备方法，其特征在于，所述步骤1中维生素C溶液的浓度为400μg/ml。
4.根据权利要求2所述的纳米硒负载VP1基因siRNA的制备方法，其特征在于，所述步骤1中亚硒酸钠溶的浓度为400μg/ml。
5.根据权利要求3所述的纳米硒负载VP1基因siRNA的制备方法，其特征在于，所述步骤1中维生素C溶液与亚硒酸钠溶的体积比为1:40。
6.根据权利要求2所述的纳米硒负载VP1基因siRNA的制备方法，其特征在于，所述步骤1的搅拌速度为200-300rpm，搅拌时间为0.5-1h。
7.根据权利要求2所述的纳米硒负载VP1基因siRNA的制备方法，其特征在于，所述步骤2的搅拌速度为200-300rpm，搅拌时间为0.5-1h。
8.根据权利要求2所述的纳米硒负载VP1基因siRNA的制备方法，其特征在于，所述步骤2的离心速度为8000-12000rpm，离心时间为15-30min。
9.根据权利要求2所述的纳米硒负载VP1基因siRNA的制备方法，其特征在于，所述步骤1的维生素C溶液与亚硒酸钠溶液混合的方式为：将维生素C溶液逐滴加入到亚硒酸钠溶液中。
10.一种如权利要求1所述的纳米硒负载VP1基因siRNA应用于制备抑制EV71病毒感染的药物。
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