[发明专利]一种直接静脉回输的CAR-T细胞冻存液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种直接静脉回输的CAR-T细胞冻存液，其特征在于，含有以下体积百分比的各成分：二甲基亚砜2.0-10.0v/v％；转化糖溶液2.0-20.0v/v％；右旋糖苷溶液5.0-40.0v/v％；葡萄糖溶液1.0-10.0v/v％；人血白蛋白溶液10.0-40.0v/v％；生理盐水5.0-25.0v/v％。

2.如权利要求1所述的直接静脉回输的CAR-T细胞冻存液，其特征在于，含有以下体积百分比的各成分：二甲基亚砜5.5v/v％；转化糖溶液5.0v/v％；右旋糖苷溶液35.0v/v％；葡萄糖溶液5.0v/v％；人血白蛋白溶液30.0v/v％；生理盐水19.5v/v％。

3.如权利要求1或2所述的直接静脉回输的CAR-T细胞冻存液，其特征在于，所述转化糖溶液的浓度为5wt％；右旋糖苷溶液的浓度为6wt％；所述葡萄糖溶液的浓度为5wt％；所述人血白蛋白溶液的浓度为20wt％。

4.如权利要求3所述的直接静脉回输的CAR-T细胞冻存液，其特征在于，所述二甲基亚砜为USP临床级；所述转化糖、右旋糖苷、葡萄糖、人血白蛋白及生理盐水均是以原料药或医用注射液的形式加入，只要其有效成分的终浓度满足上述要求即可。

5.如权利要求4所述的直接静脉回输的CAR-T细胞冻存液，其特征在于，所述转化糖是以转化糖电解质注射液的形式加入；所述右旋糖酐是以右旋糖酐40葡萄糖注射液的形式加入。

6.如权利要求5所述的直接静脉回输的CAR-T细胞冻存液，其特征在于，所述葡萄糖是以右旋糖酐40葡萄糖注射液和葡萄糖注射液的形式加入；所述人血白蛋白是以人血白蛋白注射液的形式加入；所述生理盐水是以0.9％氯化钠注射液的形式加入。

7.一种权利要求6所述的CAR-T细胞冻存液的制备方法，其特征在于，包括：将二甲基亚砜、转化糖溶液、右旋糖酐溶液、葡萄糖溶液、人血白蛋白溶液、生理盐水分别按照上述比例配制，混合即可。

8.一种直接静脉回输的CAR-T细胞冻存液体外冻存CAR-T免疫细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将权利要求6所述的CAR-T细胞冻存液的各组分按体积比混匀，置于4℃冰箱预冷；

2)收集所需冻存的CAR-T免疫细胞，使用0.9％氯化钠注射液洗涤两遍；

3)用预冷的冻存液重悬CAR-T免疫细胞，转移至超低温细胞冻存袋中；

4)将装有CAR-T免疫细胞的超低温细胞冻存袋置于程序降温仪中进行程序降温，冻存完成后转移至液氮罐长期保存。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，冻存的CAR-T免疫细胞使用时，从液氮罐中取出超低温细胞冻存袋，立即置于复温仪中解冻至18℃，解冻后CAR-T免疫细胞需在30min内完成静脉输注。

10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述超低温细胞冻存袋为可承受-196℃低温的Freezing Bags；所述程序降温仪的降温程序为1℃/min；所述CAR-T免疫细胞的冻存密度为5.0×10⁶/ml-1.0×10⁷/ml。