[发明专利]分散液液微萃取气相色谱联用检测发酵酒中的主要高级醇

说明书

本发明公开了分散液液微萃取气相色谱联用检测发酵酒中的主要高级醇，属于分析化学技术领域。本发明选用适当的萃取剂和分散剂，将一定量的萃取剂、分散剂和内标混合后快速注入酒样中形成乳浊液进行萃取，离心收集萃取相，进行气相色谱‑质谱分析，并通过外标法进行定量，从而得到发酵酒中更高级醇含量的分析结果。利用DLLME方法进行样品前处理具有有机溶剂用量少快速，简便，同时有机溶剂用量小且检测结果精确度高，回收率令人满意。考虑到低成本和环保的优点，该方法在实践中易于使用，尤其适合大批量样品分析，并能运用于多种发酵酒中主要高级醇含量的检测。

技术领域

本发明涉及分散液液微萃取气相色谱联用检测发酵酒中的主要高级醇，属于分析化学技术领域。

背景技术

酒类饮料中风味的形成主要依赖于各种风味化合物。风味是影响酒精饮料质量最重要的因素之一。高级醇(HAs)是发酵酒精饮料中重要的风味贡献物之一。酒精饮料中的高级醇主要包括正丙醇，2-甲基-1-丙醇(异丁醇)，3-甲基-1-丁醇(异戊醇)和β-苯乙醇，占高级醇总量的70％-80％。虽然，高级醇对酒精饮料的香气和味道有着重要的影响。但是，高浓度高级醇会产生类似于杂醇油味的不好的气味，影响酒精饮料的品质。据报道，酒精饮料中高浓度的高级醇能使神经系统充血，使人感觉上头。因此，对发酵酒精饮料的风味质量来说适当含量的高级醇非常重要。

目前主要通过气相色谱检测高级醇，样品制备方法主要包括液液萃取(LLE)，顶空(HS)，固相萃取(SPE)，固相微萃取(SPME)和顶空固相微萃取(HS-SPME)。SPE和HS-SPME 由于其灵敏度高，操作简单已经得到了广泛的应用。LLE作为传统的样品前处理萃取方法，常应用于酒精饮料中挥发性成分的分析。LLE的主要优点是简单快速的样品制备程序和低廉的成本。然而，由于有机溶剂用量大对身体健康和环境有害的缺点不能得到广泛应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种快速、灵敏度高、环境友好型的发酵酒中主要高级醇(正丙醇、异丁醇、异戊醇、β-苯乙醇)的检测方法，特别是一种分散液液微萃取的样品前处理方法结合气相色谱检测发酵酒中的高级醇的方法。

所述方法选用适当的萃取剂和分散剂，将一定量的萃取剂、分散剂和内标混合后快速注入酒样中形成乳浊液进行萃取，离心收集萃取相，进行气相色谱-质谱分析，并通过外标法进行定量。具体包括如下步骤：

(1)标准曲线溶液的制备

正丙醇、异丁醇、异戊醇、2,3-丁二醇和β-苯乙醇均用乙醇配成浓度梯度为110mg/mL， 70mg/mL，180mg/mL，60mg/mL和100mg/mL的储备液，-20℃保存。将储备液用模拟溶液(10％无水乙醇，用乳酸调节pH至4.00)分别稀释50、100、200、500、1000、2000倍来制备工作溶液。

(2)样品前处理

将0.00～2.00mL分散剂，200～1000μL萃取剂和30μL内标(18640mg/L 4-甲基-2-戊醇乙醇溶液)置于2.5mL离心管中混合均匀得到混合有机相。用微量注射器将所得混合有机相快速注入3～10mL置于15mL的带帽尖底玻璃离心管的酒样中。旋涡振荡器振荡0.5～3min， 5000rpm(2655G)离心5min。将下层有机相用带有长针头注射器吸出，进样GC/MS分析。

GC/MS的具体条件如下：