[发明专利]从猪小肠提取肝素钠的方法

说明书

本发明涉及肝素钠生产技术领域，提供了一种从猪小肠提取肝素钠的方法。本发明主要步骤为前处理、肠衣泡把、酶解、吸附、洗涤、洗脱、沉淀和干燥。本发明将肠衣与肠粘膜联合制取肝素钠，提高了猪小肠的利用率，增加了猪小肠的附加值，生产一亿国际单位肝素钠粗品只需1400根左右猪小肠，产品纯度高，肝素钠的效价＞110U/mg。同时，剩余的肠皮也能得到有效利用。

技术领域

本发明涉及肝素钠生产技术领域，特别涉及一种从猪小肠提取肝素钠的方法。

背景技术

肝素钠又称肝素，是一种含有硫酸基的酸性粘多糖类天然抗凝血物质。肝素钠为白色或类白色粉末，无臭无味，有引湿性，易溶于水，不溶于乙醇、丙酮、二氧六环等有机溶剂。

肝素钠广泛存在于哺乳动物肝、肺、肠黏膜中，多与蛋白质结合成复合体存在。酶解蛋白可分离肝素钠，肝素钠是含硫酸、氨基、醛糖酸的粘多糖。在pH8-9时，带负电荷，可与阴离子交换剂进行离子交换，进行粗分离，多糖液在高浓度乙醇中沉淀进行精纯。肝素钠是血液化学成分测定中最好的抗凝剂。肝素钠是一种含硫酸基团的黏多糖，分子量为1.5万，其抗凝机制是与抗凝酶Ⅱ一起，在低浓度能抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之间的作用，并能加强抗凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋白酶，从而阻止凝血酶形成；还有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子X的作用。

传统的肝素钠的酶解生产方法往往以猪小肠的肠粘膜为原料提取，肠衣往往弃做它用，存在的缺陷是：猪小肠无法有效利用，生产周期长，能耗大，收率低，生产一亿国际单位肝素钠粗品需2800-3000根猪小肠的粘膜，产品纯度低，肝素钠的效价至多为80U/mg，并产生大量的肠渣和废水，污染环境。CN1308088A的发明公开了一种利用生物发酵工艺生产肝素钠的方法。该方法采用2709蛋白酶作为催化剂，D204强碱性阴离子交换树脂作为离子交换树脂，并采用150-180目多层布筛进行过滤。该方法存在如下缺陷：产品收率、纯度也较低，并产生大量的肠渣和废水，污染环境；猪小肠取肠粘膜后剩余的肠衣、肠皮无法有效利用来获取肝素钠，猪小肠的利用效率低。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种从猪小肠提取肝素钠的方法，能对猪小肠进行综合利用，提高了猪小肠的利用率，生产周期短，产品收率、纯度较高，减少了肠渣和废水的排放，利于环保。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种从猪小肠提取肝素钠的方法，所述的工艺步骤如下：

(1)前处理：将猪小肠放入刮肠机中，获得猪小肠粘膜浆液待用，剩余肠衣、肠皮，肠皮单独用于提取肝素钠。

肠皮提取肝素钠的工艺采用发明人在先申请的公告号CN101891842A发明专利公开的方法进行。

(2)肠衣泡把：将肠衣绕把形成肠衣把，接着将肠衣把放入浸泡液中第一次浸泡4-5小时，取出沥干，使用肠衣专用盐对肠衣把腌制处理，之后，将肠衣把放入浸泡液中二次浸泡6-8小时，第一次浸泡的浸泡液为饱和氯化钠溶液，二次浸泡的浸泡液为盐度15°-18°的氯化钠溶液；第一次浸泡及二次浸泡时，每1000L浸泡液均浸泡160±5把肠衣把，收集第一次浸泡的浸出液待用，收集二次浸泡后的浸出液作为下一次提取时肠衣把第一次浸泡的浸泡液。第一次浸泡的浸泡液与二次浸泡的浸泡液的体积相同。

猪小肠经过刮肠机处理后，得到的肠衣上仍会残留小部分肠粘膜(无法提取肝素钠造成浪费)，且肠衣中也含有部分肝素钠，以往直接将肠衣经过简单腌制后就当制作香肠的原料使用，这样往往造成肠衣无法有效利用，降低了猪小肠获得肝素钠的收率。

本发明通过第一次浸泡，可将大部分在肠衣中存在的肝素钠提取出(包括肠粘膜中的)，第一次浸泡的浸出液用于下一步酶解时调节猪小肠粘膜浆液盐度的原料，无需外加氯化钠溶液，节约氯化钠溶液的用量，第一次浸泡的浸出液中也含有部分肝素钠，能与酶解获得的肝素钠汇合，无需各自提纯操作。这样节省步骤，第一次浸泡的浸出液若有多余可暂时储存用于下次提取。