[发明专利]一种快速检测交链孢酚和交链孢酚单甲醚总量的试纸条

权利要求书

1.交链孢毒素半抗原，其特征在于，其结构如式(I)所示：

2.交链孢毒素全抗原，其特征在于，由权利要求1所述交链孢毒素半抗原与载体蛋白偶联后得到的；

其中，所述载体蛋白选自牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白、人血清白蛋白。

3.根据权利要求2所述的交链孢毒素全抗原，所述载体蛋白选自牛血清白蛋白、卵清蛋白。

4.由权利要求2或3所述交链孢毒素全抗原制备的特异性抗体，包括多克隆抗体和单克隆抗体。

5.权利要求1所述交链孢毒素半抗原的制备方法，其特征在于，将交链孢酚70mg溶解到DMF 5mL中，加入碳酸钾47mg和溴丁酸甲酯30mg，加热到40℃反应5h；冷却，加入10mL水稀释，用乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，干燥，减压蒸去溶剂；然后过100-200目硅胶柱进行分离，以CH₂Cl₂：CH₃OH体积比20：1为洗脱剂，得到中间体Ⅰ，其结构如式(II)所示；将中间体Ⅰ45mg溶解到四氢呋喃-甲醇-水7mL中，加入氢氧化钠15mg搅拌过夜；减压蒸去溶剂，加入5mL水稀释，盐酸调pH为5，过滤，干燥即得；

其中，四氢呋喃-甲醇-水的体积比为3：3：1；

6.由权利要求1所述交链孢毒素半抗原制备的交链孢毒素检测试剂或试剂盒，其中所述交链孢毒素选自交链孢酚、交链孢酚单甲醚。

7.由权利要求2或3所述交链孢毒素全抗原制备的交链孢毒素检测试剂或试剂盒，其中所述交链孢毒素选自交链孢酚、交链孢酚单甲醚。

8.由权利要求4所述特异性抗体制备的交链孢毒素检测试剂或试剂盒，其中所述交链孢毒素选自交链孢酚、交链孢酚单甲醚。

9.权利要求1所述交链孢毒素半抗原，或权利要求2或3所述交链孢毒素全抗原，或权利要求4所述特异性抗体，或权利要求6-8任一项所述检测试剂或试剂盒在交链孢毒素的免疫分析检测中的应用，其中所述交链孢毒素选自交链孢酚、交链孢酚单甲醚。

10.权利要求1所述交链孢毒素半抗原，或权利要求2或3所述交链孢毒素全抗原，或权利要求4所述特异性抗体，或权利要求6-8任一项所述检测试剂在制备交链孢毒素的胶体金检测试纸条中的应用，其中所述交链孢毒素选自交链孢酚、交链孢酚单甲醚。

11.一种快速检测交链孢酚和交链孢酚单甲醚总量的试纸条，其特征在于，包括样品垫、胶体金结合垫、反应膜、吸水垫和底板，所述反应膜上设有检测线和质控线，所述样品垫、胶体金结合垫、反应膜和吸水垫依次粘贴在底板上；

其中，所述胶体金结合垫上包被有交链孢毒素特异性抗体-胶体金标记物；所述检测线包被有权利要求2或3所述交链孢毒素全抗原，所述质控线包被有羊抗鼠二抗。

12.根据权利要求11所述的试纸条，其特征在于，所述交链孢毒素特异性抗体-胶体金标记物的制备方法如下：用还原剂将氯金酸还原成胶体金纳米颗粒；将胶体金与交链孢毒素特异性抗体混合孵育30min，加入牛血清白蛋白使其终浓度为1％，反应30min后；离心纯化、浓缩即得交链孢毒素特异性抗体-胶体金标记物。

13.利用权利要求11或12所述试纸条检测交链孢毒素的方法，其特征在于，将待测样品粉碎，向2～10g样品中加入体积浓度为80％的甲醇水溶液8～50mL，混匀，振荡提取30min，静置5～10min，将上清液用水稀释，使稀释液中甲醇的终体积浓度为20％～35％，得到待测样品溶液；将待测样品溶液滴加到所述试纸条的样品垫上进行检测，根据检测线和质控线的显色结果判定。