[发明专利]一种生防木霉厚垣孢子及菌剂的高效制备方法有效
| 申请号： | 201810396215.8 | 申请日： | 2018-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN108277194B | 公开（公告）日： | 2021-05-11 |
| 发明（设计）人： | 吴晓青;张新建;张广志;周方园;赵晓燕;周红姿;谢雪迎 | 申请（专利权）人： | 山东省科学院生态研究所 |
| 主分类号： | C12N3/00 | 分类号： | C12N3/00;C12N1/14;A01P3/00;C12R1/885 |
| 代理公司： | 济南舜源专利事务所有限公司 37205 | 代理人： | 于晓晓 |
| 地址： | 250013 山东省*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 生防木霉厚垣 孢子 高效 制备 方法 | ||
1.一种生防木霉厚垣孢子的高效制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)配制草酸母液，草酸母液浓度为0.1～0.5mol/L，经0.22μm水相滤膜在无菌条件下过滤后储存在室温下；
(2)配制培养基I，所述的培养基I包括马铃薯，葡萄糖和水，马铃薯去皮200g切碎水煮30分钟，纱布过滤出滤液，滤液加20g葡萄糖，用水补足1L体积，高压灭菌115℃ 30分钟得到培养基I；
(3)配制培养基II，葡萄糖5～10g，酵母粉5～10g，蛋白胨10～20g，七水硫酸镁1.3～1.5g，硝酸铵1.5～1.9g，磷酸二氢钾1～2g，水补足1L体积，高压灭菌115℃ 30分钟得到培养基II；
(4)将草酸添加至培养基II中，无菌条件下，草酸母液添加至培养基II中，将培养基pH调至2.5～4；
(5)活化木霉菌株，将木霉菌株接种于PDA平板上，在菌株的适宜温度下半光半暗培养7天，对菌株进行活化；
(6)取活化好的木霉平板，用无菌水将分生孢子冲洗至无菌离心管，用含0.05％吐温80的无菌水将分生孢子悬浮均匀，计数制成浓度为107分生孢子/mL的悬浮液，无菌条件下，按1:100的体积比将木霉分生孢子悬浮液加入培养基I中，25℃～30℃，在转速160～180r/min条件下震荡暗培养1～2d，得到种子液；
(7)将种子液按体积比5～20:100接种至添加草酸的培养基II中，25℃～30℃，转速160～180r/min，暗培养5～7d得到发酵液；
所述的木霉为可在浓度为20～50mmol/L的含草酸培养基中生长的菌株。
2.一种生防木霉厚垣孢子菌剂的制备方法，其特征在于，采用权利要求1中的发酵液制备生防木霉厚垣孢子菌剂。
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