[发明专利]川贝母特异内源基因及真伪快速检测引物组和方法有效
| 申请号： | 201810392066.8 | 申请日： | 2018-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN108707686B | 公开（公告）日： | 2019-04-23 |
| 发明（设计）人： | 张富丽;牟梦雪;郭灵安;雷绍荣;宋君 | 申请（专利权）人： | 四川省农业科学院分析测试中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都众恒智合专利代理事务所(普通合伙) 51239 | 代理人： | 陈春华 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 川贝母 引物组 特异内源基因 真伪 特异性PCR 分子检测技术 分子鉴定技术 贝母 核苷酸序列 内源性基因 特异性引物 检测技术 快速检测 内源基因 上游引物 下游引物 真伪鉴定 假阳性 假阴性 时效性 检测 判定 图谱 克隆 物种 模糊 | ||
1.一种分离的用于检测川贝母的特异内源基因，其特征在于，如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
2.一种检测川贝母真伪的引物组，其特征在于，所述引物组用于检测权利要求1所述的核苷酸序列，所述引物组包括上游引物和下游引物，所述上游引物和下游引物的序列分别如下：
BMH-YF：CAGCAGGAATCCCAAGC；
BMH-YR：GGTTGGCACAGTTGGAGG。
3.一种利用权利要求2所述的引物组检测川贝母真伪的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1.合成引物；
步骤2.制备DNA稀释液；
步骤3.配制PCR反应体系；
步骤4.PCR及电泳检测；
所述方法的结果判断标准为：若阳性对照和待检测样品均扩增出234bp目标条带，而空白对照未出现条带，则可判定检测的样品中含有川贝母成分；若阳性对照扩增出条带，空白对照未出现条带，待检测对照未扩增出条带，则可判定检测的样品中不含有川贝母成分。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤1中合成的引物浓度均为10μmol/l，步骤2中制备的DNA稀释液的浓度为50ng/μl。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤3中所述的配制PCR反应体系为将步骤2制得的DNA稀释液加入到25μl反应体系中，所述25μl的反应体系包括以下组分：
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤4中，所述PCR的反应条件为：95℃预变性10min，1个循环；95℃变性30s，54℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环；然后延展72℃延伸7min。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤4中，所述电泳检测的检测条件为：将PCR扩增产物用2.0％琼脂糖凝胶90V电泳40min后凝胶成像仪照相分析。
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