[发明专利]西瓜粘籽基因SNP分子标记及其筛选方法和应用

权利要求书

1.一种西瓜粘籽基因SNP位点的dCAPs分子标记的扩增引物在鉴定和辅助筛选粘籽种质类型西瓜中的应用，其特征在于，扩增所述分子标记的上游引物核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示；扩增所述分子标记的下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.一种西瓜粘籽基因型的鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：

a. DNA提取：利用CTAB法提取西瓜叶片总DNA；

b. PCR扩增：

反应体系为：100 ng/μL的西瓜叶片总DNA 1μl、权利要求1中 所述上游引物1 μl、权利要求1中 所述下游引物1 μl、2×Power Taq PCR MasterMix 12.5 μl、ddH₂O 9.5 μl；

反应程序为：94℃ 5 min，35个循环的94℃ 20 s、55℃ 1 min、72℃ 30 s、72℃ 5min；

c. 酶切反应体系和程序：

反应体系为：PCR产物5 μl， Tag I限制性内切酶0.5μl，10×buffer 1.5 μl，ddH₂O 8 μl；

反应程序为：65℃恒温处理10小时；

d.电泳图谱分析：对所述酶切产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳、显影、染色和带型判读，找到目标条带，根据扩增产物的条带大小及位置关系确定所属基因型，165bp的条带代表粘籽西瓜基因型，184bp的条带代表非粘籽西瓜基因型。