[发明专利]一种磷光探针选择性检测凝血酶的方法有效
| 申请号： | 201810388863.9 | 申请日： | 2018-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN108375563B | 公开（公告）日： | 2020-12-15 |
| 发明（设计）人： | 李妍;熊艳;叶雨萌;张菲 | 申请（专利权）人： | 天津师范大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G01N33/573;G01N33/86 |
| 代理公司： | 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 | 代理人： | 朱红星 |
| 地址： | 300387 *** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 磷光 探针 选择性 检测 凝血酶 方法 | ||
1.一种免标记且结合凝血酶适配体的“off-on”型磷光探针定量检测凝血酶的方法，其特征在于按如下的步骤进行：
（1）向离心管中依次加入5-50 μLMPA包覆的Mn掺杂ZnS量子点母液，0.1M 的50 μL pH=6.0-9.0 Tris-HCl缓冲溶液混合均匀后，再向其中加入50 μL梯度浓度1 μM-11 μMTBA溶液作为磷光猝灭剂，加高纯水定容至500 μL，摇匀静置1-40 min后，将荧光分光光度计调成磷光检测模式，设置激发波长为315 nm进行检测；
（2）向离心管中依次加入5-50 μLMPA包覆的Mn掺杂ZnS量子点母液，0.1M的50 μL pH=6.0-9.0 Tris-HCl缓冲溶液混合均匀后，再向其中加入50 μL梯度浓度1μM-11 μMTBA溶液作为磷光猝灭剂，加高纯水定容至450 μL，摇匀静置1-40 min，待其磷光猝灭达到平衡状态后，加入50 μL梯度浓度0.223-22.3μM凝血酶溶液作为磷光恢复剂，摇匀静置1-45 min后，将荧光分光光度计调成磷光检测模式，设置激发波长为315 nm进行检测；
（3）以步骤（1）对磷光量子点探针的磷光进行猝灭，以步骤（2）对量子点的磷光进行恢复，并以其对步骤（1）的磷光恢复响应值为检测信号，检测样品中凝血酶的浓度；所述凝血酶样品须溶解于自制生理盐水中，自制生理盐水配方为：称取0.8克氯化钠，溶解在少量高纯水中，稀释到100毫升，高纯水须用0.45 μm水系膜过滤。
2.权利要求1所述的免标记且结合凝血酶适配体的“off-on”型磷光探针定量检测凝血酶的方法在提高检测的灵敏度和选择性方面的应用。
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