[发明专利]一种脉冲电场-双水相-柱层析组合提取植物多酚的方法

权利要求书

1.一种脉冲电场-双水相-柱层析组合提取植物多酚的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)对待提取植物进行预处理，得原料液；

(2)以乙醇为溶剂，利用脉冲电场提取原料液中的活性物质，得提取液；

(3)提取液过滤后采用双水相萃取提取液中的活性成分，得植物多酚粗提液；

(4)植物多酚粗提液旋蒸除醇后采用柱层析法对提取物中活性物质进行纯化；

(5)浓缩干燥即得植物多酚产品。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述待提取植物为杨梅或青钱柳。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述待提取植物为杨梅时，预处理方法为：清水洗净后用果蔬打浆机去核打浆，然后加入体积浓度为70％乙醇溶液，搅拌均匀后制备成杨梅果汁悬浊液，并采用稀盐酸使杨梅果汁悬浊液呈酸性即得原料液。

4.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述待提取植物为青钱柳时，预处理方法为：将青钱柳干叶去梗，在60～70℃的电热恒温鼓风干燥箱中烘干5～6h，然后用超微粉碎机粉碎，过80目筛后分散在体积浓度为70％的乙醇中，配制成浊液即得原料液。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(2)中脉冲电场提取条件为：将原料液转至脉冲电场提取腔，调节电极间距4～5mm，放电电源采用双极性脉冲电源或方波脉冲电源，调节电压使电场强度达到20～30kV/cm，放电20～30次后停止处理，提取腔中总停留时间3～5min，放电结束后将悬浊液移出提取腔，并用双层滤布过滤，保留滤液即提取液。

6.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(3)中双水相萃取条件为：

向提取液中加入体积浓度80％的乙醇和硫酸铵，持续搅拌同时滴加稀盐酸至pH为2.5～3.5，搅拌均匀后静置，分层后取上相醇液即植物多酚粗提液。

7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，乙醇加入量与提取液的体积比为1:1～1:3；硫酸铵加入质量与提取液的体积比为0.2g/mL～0.4g/mL。

8.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(4)中柱层析条件为：将旋蒸除醇后的稀释液以2～3mL/min的速率上柱，然后用体积浓度80％的脱气乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液。

9.根据权利要求8所述方法，其特征在于，层析柱内的树脂经如下方法预处理：取AB-8极性吸附树脂，用无水乙醇或体积分数90％的与纯浸泡10～20h，然后用去离子水清洗，至洗出液澄清且无乙醇味，再依次用NaOH水溶液、去离子水和醋酸溶液洗脱柱子，最后用蒸馏水冲洗柱子至中性。

10.根据权利要求1所述方法，其特征在于，干燥采用喷雾干燥。