[发明专利]一种含有叶绿体转运肽的基因序列的应用在审
| 申请号： | 201810365955.5 | 申请日： | 2018-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN110386966A | 公开（公告）日： | 2019-10-29 |
| 发明（设计）人： | 薛松;朱振;曹旭鹏;苑广泽 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 主分类号： | C07K14/415 | 分类号： | C07K14/415;C12N15/29;C12N15/79;C12N1/13;C12R1/89 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 刘凯强 |
| 地址： | 116023 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 叶绿体转运肽 基因序列 同步化 二酰基甘油酰基转移酶 应用 基因表达载体 生物工程领域 转基因衣藻 磷脂 蛋白表达 合成能力 莱茵衣藻 生物能源 微藻生长 油脂积累 总脂肪酸 野生型 构建 微藻 衣藻 积累 生长 转化 | ||
1.一种含有叶绿体转运肽的基因序列的应用，其特征在于，在叶绿体转运肽的基因序列下游插入目的基因，使得目的基因的编码蛋白定位于叶绿体。
2.如权利要求1所述的含有叶绿体转运肽的基因序列的应用，其特征在于，所述含有叶绿体转运肽的基因序列为序列表SEQ ID NO.2所示。
3.如权利要求1或2所述的含有叶绿体转运肽的基因序列的应用，其特征在于，所述目的基因为含有编码磷脂二酰基甘油酰基转移酶功能域的基因碱基序列。
4.如权利要求3所述的含有叶绿体转运肽的基因序列的应用，其特征在于：所述目的基因为SEQ ID NO.1；
或，所编码蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO.1基因编码的氨基酸序列相似度达30％或以上的基因序列。
5.根据权利要求1-4中任一含有叶绿体转运肽的基因序列的应用，其特征在于：应用于提高衣藻脂肪酸积累并与生长同步化。
6.一种重组质粒，其特征在于：该质粒含有权利要求1所述叶绿体转运肽的基因序列及其下游插入目的基因所述的片段。
7.如权利要求6所述的重组质粒，其特征在于：
所述叶绿体转运肽的基因序列为SEQ ID NO.2；
所述目的基因序列为SEQ ID NO.1，
或，所编码蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO.1基因编码的氨基酸序列相似度达30％或以上的基因序列。
8.一种含有权利要求5或6所述的重组质粒的转基因衣藻。
9.如权利要求8所述转基因衣藻在提高衣藻脂肪酸积累并与生长同步化过程中的应用。
10.一种具有提高脂肪酸积累与生长同步化的衣藻的构建方法，步骤如下：
1)构建含有权利要求1所述叶绿体转运肽的基因序列及其下游插入目的基因所述的片段的过表达载体；
所述叶绿体转运肽的基因序列为SEQ ID NO.2；
所述目的基因为SEQ ID NO.1，
或，所编码蛋白的氨基酸序列与SEQ ID NO.1基因编码的氨基酸序列相似度达30％或以上的基因；
2)将步骤1)中得到的所述叶绿体型磷脂二酰基甘油酰基转移酶过表达载体转化至衣藻细胞中，得到磷脂二酰基甘油酰基转移酶过表达的转基因衣藻；
所述表达载体构建过程如下：利用RF克隆技术构建重组表达载体；
所述转化方法为：所述转化方法采用电转法，也可以采用玻璃珠法，基因枪法；
所述衣藻为野生型莱茵衣藻。
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