[发明专利]一种嗜热栖热菌和酵母菌组合发酵的方法

权利要求书

1.一种嗜热栖热菌和酵母菌组合发酵的方法，该方法包括如下步骤：

步骤1：分别对酿酒酵母菌和嗜热栖热菌进行增菌培养；

其中，酿酒酵母菌增菌方法如下：

(1)在超净工作台上取试管斜面上的酿酒酵母CICC1596一环，接入装有50mL培养液(pH为4.8±0.2)的250mL三角瓶中，200rpm(每分钟转200转)，30℃培养10h左右，菌体处于对数生长期；

(2)将处于对数生长期的菌体接种到装有2L(pH为4.8±0.2)的2.5L三角瓶中，接种量为10％(体积百分数，200毫升步骤(1)的处于对数生长期的酵母培养液)，200rpm，30℃培养10h左右；

(3)将步骤(2)培养后的3L菌种接种到装有30L发酵液(pH为4.8±0.2)的一级种子50L罐中，通气量维持在5m³/h/50L,200rpm，30℃培养10h左右；

(4)将30L菌液转移到装有300L的二级种子500L罐中，通气量维持在5m³/h/50L,200rpm，30℃培养10h左右；

其中，嗜热栖热菌增菌方法如下：在超净工作台上取嗜热栖热菌HB27冻存液2mL接入装有2L培养液(pH为7.8±0.2)的2.5L三角瓶中，通气量维持在5m³/h/50L,150rpm，65℃培养12h左右，菌体处于对数生长期后，将30L菌液接种到300L培养液的500L二级种子罐中，通气量维持在5m³/h/50L,150rpm，65℃培养12h左右；步骤2:对酵母的一次发酵方法如下：

对酵母的一次发酵方法如下：将300L的二级种子罐中(经过步骤(4)后的)的酵母菌培养液转移到装有2400L培养液(pH为4.8±0.2)的5000L发酵罐中，通气量维持在5m³/h/50L,200rpm，30℃培养14h左右；

步骤3:二次发酵

将一次发酵(步骤2)培养液温度从30℃提升到65℃后，立即将300L嗜热栖热菌增菌液转移到此发酵罐中，通气量维持在5m³/h/50L,150rpm搅拌，用碱液将pH值调节到7.8±0.2，150rpm，65℃培养18h左右；

其中，培养液的配方为：20L培养液的配比为60g蛋白胨、4g麦芽汁、7g无水硫酸镁、2.4g磷酸二氢钾、40g硫酸铵、1g无水氯化铁、5g氯化钠，pH值用酸或碱进行调节控制，其余为水。