[发明专利]一种采用配位柱层析法分离纯化东莨菪碱的方法

说明书

本发明公开了一种采用配位柱层析法分离纯化东莨菪碱的方法，通过东莨菪碱粗提物的制备、配位层析柱的制备、层析柱平衡、层析分离、流出液合并与干燥等步骤制得纯化后的东莨菪碱。本发明对现有的东莨菪碱色谱分离法进行改进，在层析分离介质中引入配位剂，使得东莨菪碱提取物只需一步层析分离即可达到较高纯度(纯度为90％‑99％，回收率为70％‑85％)，大大缩短了生产流程，减少了有机溶剂的使用量，降低了生产成本。

技术领域

本发明涉及原料药制备领域，具体涉及一种采用配位柱层析法分离纯化东莨菪碱的方法。

背景技术

东莨菪碱是一种广泛存在于茄科植物中的生物碱，其具有解痉、散瞳、抗胆碱、镇痛、镇静等多种功能，已被广泛应用于临床药学中，国内外对其纯品需求量非常的大。然而，由于东莨菪碱本身为手性分子，其药用有效形态为左旋体，故在提取分离过程中，受酸碱环境、光照、温度等条件的影响，东莨菪碱易消旋化生成D,L-东莨菪碱，失去光学活性。为此，采取色谱法进行东莨菪碱的分离以更好的保持其稳定性已取得了一定程度的应用，例如：氧化铝色谱、强酸性阳离子交换色谱等。但是，传统色谱分离仍存在富集性差、产品得率低、回收率低、纯度低等一系列问题，特别是对诸如东莨菪碱此类在植物内含量较低且结构相似的干扰物质含量较高的组分，在进行色谱分离前往往需要辅助多步液液萃取进行初步处理，且在色谱分离后需采用其他方式进行精细纯化才能达到高纯度要求，这使得分离工艺繁琐而冗长，增加了东莨菪碱的生产成本，因此，对东莨菪碱的色谱分离法进行改进，使其具有更高的富集性和分离效果具有重大的意义。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，旨在提供一种采用配位柱层析法分离纯化东莨菪碱的方法，以提高东莨菪碱的富集性和分离效果。

本发明采用配位柱层析法分离纯化东莨菪碱的方法，包括如下步骤：

步骤1：东莨菪碱粗提物的制备

取干燥的洋金花用粉碎机粉碎，过40目筛，得到洋金花粉末；将所得洋金花粉末加入氨水与二氯甲烷的混合液中进行超声波提取，过滤，滤渣重复提取两次，合并提取液并干燥后即得东莨菪碱粗提物；

步骤2：配位层析柱的制备

取填料与配位剂置于样品粉碎机中研磨，得到粒径为5-15μm的粉末，然后加入乙酸乙酯，混合均匀后装入4.6mm×250mm色谱柱，静置1d，使配位离子与填料充分配位结合，即得配位层析柱；

步骤3：配位层析柱平衡

用乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液冲洗步骤2得到的配位层析柱，冲洗至无配位离子反应为止；

步骤4：层析分离

将东莨菪碱粗提物用乙酸乙酯复溶，过滤除去不溶物后加入配位层析柱中，待样品吸附完全后用乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液洗脱，分段收集流出液，用HPLC检测各段流出液中东莨菪碱的含量；

步骤5：流出液合并与干燥

将步骤4中东莨菪碱含量≥90％的流出液(低于该浓度的流出液均浓缩后再重新层析分离)合并并在减压条件下浓缩干燥，即得纯化后的东莨菪碱。

步骤1中，洋金花粉末与二氯甲烷的质量体积比为1g:10mL；洋金花粉末与氨水(质量浓度为23-25％)的质量体积比为1g:2mL。

步骤1中，超声波提取的功率为250W，时间为30min。

步骤2中，所述填料为硅胶、氧化铝、聚酰亚胺中的任意一种；所述配位剂为醋酸钠、硫酸铜、硝酸银、氯化镁、氯化钙中的一种或几种；配位剂的添加质量为填料质量的2％-15％。

步骤3、4中，所述乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液是由乙酸乙酯、甲醇和浓氨(质量浓度为23-25％)按体积比17:2:1的比例混合构成。

步骤4中，HPLC检测条件为：