[发明专利]利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法及其应用

说明书

本发明公开了一种利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法及其应用，利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法按照下述步骤进行：将Cd²⁺加入到Datko培养基上，得到含镉Datko培养基；将浮萍培养于得到的含镉Datko培养基上，培养24小时，得到浮萍植株；夹取浮萍植株，用A液清洗后，将所述浮萍植株放入离心管中，加入组织固定液固定所述浮萍植株15～20min；利用全景细胞多维系统分析检测，通过荧光对镉离子进行定位分析，根据荧光强度分析镉离子含量。本发明首创利用全景细胞多维系统检测水体中的镉离子，可在短时间内检测水体中有无镉离子，应用于水体镉污染检测，弥补了传统的镉离子测定方法的缺点。

技术领域

本发明属于镉离子检测技术领域，具体来说涉及一种利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法及其应用。

背景技术

镉离子污染严重威胁人类健康，是致癌物之一，能引起肺、前列腺和睾丸的恶性肿瘤。近年来，痕量镉的分析技术在不断发展。传统的镉离子检测方法主要有原子吸收光谱法、紫外分光光度法、电感耦合等离子体质谱法和电感耦合等离子体原子发射光谱分析等方法。这些方法存在价格昂贵，干扰因素多等缺点。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法及其应用，该方法利用水生植物浮萍吸收镉离子，Leadamium^TM Green AM染料可追踪镉离子定位。

本发明的目的是通过下述技术方案予以实现的。

一种利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法，按照下述步骤进行：

步骤1，调整Datko培养基的PH至5.6～5.8，于100～105kPa、120～125℃下进行灭菌；所述Datko培养基如下：

在所述步骤1中，灭菌时间为20～25分钟。

步骤2，将Cd²⁺加入到步骤1得到的Datko培养基上，得到含镉Datko培养基；

步骤3，采集浮萍，将浮萍培养于步骤2得到的含镉Datko培养基上，培养24小时，得到浮萍植株；其中，培养条件为：温度18～25℃，光周期16～18小时/天，光强95～97μmol m^-2s^-1；

步骤4，夹取步骤3得到的浮萍植株，用A液清洗后，将所述浮萍植株放入离心管中，加入组织固定液固定所述浮萍植株15～20min；其中，所述组织固定液如下：

乙醇水溶液 85～95g/l

冰醋酸 95～100g/l

去离子水 溶剂，

其中，在所述乙醇水溶液中，乙醇的体积浓度为80～90％；

所述A液如下：

在所述步骤3中，所述A液的PH为7～8。

步骤5，在酶解温度为23～27℃的条件下，用组织酶解液在黑暗条件下酶解步骤4所得的浮萍植株25～30min，每间隔10～15min吹打混匀一次，得到悬浮的浮萍原生质体；所述组织酶解液如下：

步骤6，通过离心对步骤5所得的浮萍原生质体清洗2～5次，每次清洗的过程为：用20～25℃的B液垂直打入浮萍原生质体所在离心管，以使浮萍原生质体悬浮，悬浮后进行离心，离心后移除上层清液；

所述B液如下：