[发明专利]一种抗真菌药物靶点及其制备和应用在审
| 申请号: | 201810332992.6 | 申请日: | 2018-04-13 |
| 公开(公告)号: | CN108610401A | 公开(公告)日: | 2018-10-02 |
| 发明(设计)人: | 曹张军;姜静;蒋晨晓 | 申请(专利权)人: | 东华大学 |
| 主分类号: | C07K14/40 | 分类号: | C07K14/40;C12N15/70;C12Q1/34 |
| 代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所 31233 | 代理人: | 黄志达;魏峯 |
| 地址: | 201620 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 靶点 抗真菌药物 制备和应用 高通量筛选技术 翻译起始因子 氨基酸序列 白色念珠菌 靶点蛋白 药物筛选 激活剂 抑制剂 蛋白 筛选 研究 | ||
1.一种抗真菌药物靶点,其特征在于:所述抗真菌药物靶点为白色念珠菌翻译起始因子蛋白Tif1,其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.一种抗真菌药物靶点的制备方法,包括:
(1)将白色念珠菌体内翻译起始因子Ca-tif1的原核表达载体转入大肠杆菌BL21感受态细胞中,恒温培养后挑取单克隆进行活化,然后转入培养基中培养至OD600到0.6~0.8;
(2)将菌液中加入诱导剂,恒温培养,得到诱导后菌液,然后进行电泳,染色,脱色,最后进行蛋白纯化。
3.根据权利要求2所述的一种抗真菌药物靶点的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中白色念珠菌体内翻译起始因子Ca-tif1的原核表达载体为pET-28a-Ca-tif1。
4.根据权利要求2所述的一种抗真菌药物靶点的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中活化为37℃活化12h。
5.根据权利要求2所述的一种抗真菌药物靶点的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中诱导剂为异丙基硫代半乳糖苷IPTG。
6.根据权利要求2所述的一种抗真菌药物靶点的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中蛋白纯化为:采用AKTA蛋白质纯化系统进行纯化。
7.一种抗真菌药物靶点的应用,其特征在于:白色念珠菌翻译起始因子蛋白Tif1作为抗真菌药物靶点进行抗真菌药物的筛选。
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