[发明专利]一种Bacteroides xylanisolvens的筛选培养基及其应用

说明书

本发明公开了一种Bacteroides xylanisolvens的筛选培养基及其应用，属于微生物领域。本发明提供的培养基配制方便，成本低，培养基中含有万古霉素、卡那霉素、唯一碳源及产酸指示剂等物质，配合使用后，能利用该唯一碳源的Bacteroidesxylanisolvens单菌落会在固体培养基表面发生显色反应，以此达到提高菌群样品中较低丰度的Bacteroides xylanisolvens的分离效率。

技术领域

本发明涉及一种Bacteroides xylanisolvens的筛选培养基及其应用，属于微生物领域。

背景技术

Bacteroides xylanisolvens从属于拟杆菌属、拟杆菌门，为革兰氏阴性严格厌氧菌，无质粒；对氧气及其敏感，只能在完全无氧的环境中生长良好。可代谢木聚糖等多糖，也可代谢半纤维素、木糖等小分子糖。

Bacteroides xylanisolvens是人体正常肠道菌之一，但丰度较低。B.xylanisolvens的碳水化合物利用系统显著地优于其他拟杆菌种，能够在不同的碳源环境下高质量地存活。并且B.xylanisolvens能够提高血清中针对Thomsen-Friedenreich抗原的特异性免疫球蛋白M抗体的含量，已有研究表明该抗体对癌症的形成具有积极地抑制作用。因此，B.xylanisolvens所具有的免疫调节作用及强大的环境适应力正是微生物学家寻找的新一代益生元、益生菌所必备的特性之一。

目前对于Bacteroides xylanisolvens调节宿主免疫应答作用的机制尚不明朗。并且，布氏绵羊血培养基作为已知的普通拟杆菌(Bacteroidales)有效筛选手段(《Infection and Immunity》,2011,5,2012-2020)，只能大概率能分离得到肠道内高丰度的拟杆菌种，而较难得到低丰度的B.xylanisolvens，因而限制了其深入的科学研究。因此，如何设计特异性培养基从而高效的分离B.xylanisolvens，为研究该菌与人体健康的关系提供技术支持是亟待解决的技术问题。

发明内容

本发明提供了一种Bacteroides xylanisolvens特异性筛选培养基及其应用方法，培养基中含有万古霉素、卡那霉素、唯一碳源及产酸指示剂等物质。配合使用后，能利用该唯一碳源的B.xylanisolvens单菌落会在固体培养基表面发生显色反应，以此达到提高菌群样品中较低丰度的B.xylanisolvens的分离效率，为研究该菌与人体健康的关系提供技术支持。

本发明的第一个目的是提供了一种Bacteroides xylanisolvens特异性筛选培养基，所述培养基包括分离培养基和生长培养基，所述分离培养基中含有万古霉素、卡那霉素、唯一碳源及产酸指示剂等物质。

在本发明的一种实施方式中，所述唯一碳源为阿拉伯糖。

在本发明的一种实施方式中，所述产酸指示剂为溴甲酚紫。

在本发明的一种实施方式中，所述分离培养基包括如下组分：唯一碳源阿拉伯糖4-6g/L，胰蛋白胨15-25g/L，酵母提取物4-6g/L，氯化钠4-6g/L，磷酸氢二钾0.04-0.06g/L，磷酸二氢钾0.04-0.06g/L，半胱氨酸盐酸盐0.5-1g/L，氯化血红素0.005-0.01g/L，维生素K10.001-0.002g/L，产酸指示剂溴甲酚紫0.010-0.014g/L，卡那霉素硫酸盐溶液4-5ml/L，万古霉素盐酸盐溶液2.0-2.5ml/L，琼脂15-20g/L，余量为无菌水，pH值为6.8-7.0。

在本发明的一种实施方式中，所述生长培养基的配方包括如下组分：脑心浸液液体培养基，半胱氨酸盐酸盐0.5-1g/L，氯化血红素0.005-0.01g/L，维生素K10.001-0.002g/L，余量为无菌水。

在本发明的一种实施方式中，所述唯一碳源为木聚糖。