[发明专利]一种光动力治疗复合物及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种复合物，由纳米粒子、血红蛋白和磷脂层组成；

所述纳米粒子由式I和式II所示化合物自组装而得；

所述血红蛋白修饰于所述纳米粒子表面；

所述磷脂层包覆所述血红蛋白和纳米粒子；

所述式I中，n为560-960。

2.根据权利要求1所述的复合物，其特征在于：所述血红蛋白选自牛血红蛋白、猪血红蛋白和人血红蛋白中的至少一种；

所述血红蛋白的分子量为60-70kDa；

构成所述磷脂层的材料为POPC、DOPE、DOTAP和胆固醇；

所述式I所示化合物与式II所示化合物的质量比为1-5：1；

所述纳米粒子与所述血红蛋白的摩尔比为1：2-5；

所述纳米粒子与POPC的质量比为1：10-20；

所述POPC、DOPE、DOTAP和胆固醇的质量比为5-6:3.5-4.5:0.2-0.3:0.2-0.3。

3.根据权利要求2所述的复合物，其特征在于：所述血红蛋白的分子量为68kDa；

所述式I所示化合物与式II所示化合物的质量比为2:1；

所述POPC、DOPE、DOTAP和胆固醇的质量比为6:3.5:0.3:0.2。

4.一种制备权利要求1-3任一所述复合物的方法，包括如下步骤：

1）将式I和式II所示化合物进行自组装，得到纳米粒子；

2）在酰胺缩合反应的条件下，将步骤1）所得纳米粒子与所述血红蛋白进行反应，得到中间产物；

3）将构成所述磷脂层的材料和胆固醇于溶剂中混合成膜后，加入步骤2）所得中间产物后水化，将所得乳浊液用聚碳酸酯膜挤出，即得。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述步骤1）自组装步骤中，式I所示化合物与式II所示化合物的质量比为1-5：1；所用溶剂为四氢呋喃；

所述自组装的方法包括：将所述式I和式II所示化合物溶解于所述溶剂中后于超纯水中进行超声分散后搅拌，过滤而得；

所述超声分散步骤中，超声功率为50-60W；超声时间为3-5min；

所述搅拌步骤中， 温度为常温；时间为8-20小时，

所述过滤步骤中，滤膜孔径为0.2-0.22μm；

所述步骤2）酰胺缩合反应步骤中，所用活化剂为NHS和EDC；

步骤1）所得纳米粒子与所述血红蛋白的摩尔比为1：2-5；

所述酰胺缩合反应在缓冲溶液中进行；

反应温度为20-30℃；

反应时间为12-36h。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述步骤1）自组装步骤中，式I所示化合物与式II所示化合物的质量比为2:1；所用溶剂为四氢呋喃；

所述搅拌步骤中，时间为12小时；

所述缓冲溶液为pH值为7.4的PBS缓冲液；

反应温度为25℃；

反应时间为24h。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述步骤3）中，构成所述磷脂层的材料为POPC、DOPE和DOTAP；

所述纳米粒子与POPC的质量比为1：10-20；

所述POPC、DOPE、DOTAP和胆固醇的质量比为5-6:3.5-4.5:0.2-0.3:0.2-0.3；

所述溶剂为氯仿；

所述POPC、DOPE、DOTAP和胆固醇在所述溶剂中的浓度均为8-12 mg/mL；

所述成膜步骤中，成膜方法为旋转蒸发除溶剂；

所述水化步骤中，温度为25-37℃；时间为1-2h；

所述挤出步骤中，所述聚碳酸酯膜的孔径为150-250nm；

挤出次数为8-10次。