[发明专利]大肠杆菌检测试剂盒在审
| 申请号： | 201810321123.3 | 申请日： | 2018-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN110358809A | 公开（公告）日： | 2019-10-22 |
| 发明（设计）人： | 何方洋;冯才伟;汪善良;袁光宇;谢体波;龚维瑶;吴紫洁;钟新敏;程茹;张凯 | 申请（专利权）人： | 贵州勤邦食品安全科学技术有限公司;贵州安为天检测技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844;C12Q1/689;C12Q1/10;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 550009 贵州*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 大肠杆菌 试剂盒 特异性引物 引物 合成酶 核酸等温扩增检测 大肠杆菌检测 反应混合液 阳性质控品 样品处理液 引物混合液 检测试剂 酶混合液 培养基 检测 | ||
1.一种应用核酸等温扩增检测大肠杆菌的检测引物，其特征在于，由下列引物组成：
引物1：5’-GGCCAAGGATTAGCTGTACA-3’
引物2：5’-GCTAATCCTATAGCAGCGCCATGACGTTATAGGCTACAATTA-3’
引物3：5’-CTTTCCTTGTGGACTTGTAC-3’
引物4：5’-AGAACAAGCTGATGATTTTATATCCAAGACTGTTGATATTTT-3’。
2.一种食品中大肠杆菌的检测方法，其特征在于，样品增菌、DNA获取方法、经权利1所述引物进行核酸等温扩增及结果验证方法。
3.根据权利要求2 所述的检测方法，其特征在于，所述的样品为大多数肉类、熟食，但不限于所述样品。
4.根据权利要求2 或3 所述的检测方法，其特征在于，样品粉碎匀浆，称取1-2g匀浆样品，加入到5-10mL选择性培养基中，42℃摇床培养6-8小时增菌，低温10000-12000r/min离心5-10min，0.5mL样品处理液稀释，煮沸5-10min作为检测模板。
5.根据权利要求4所述获得的扩增产物，有效结果为阳性对照呈梯状条带，具体是阳性对照出现梯状条带为必要条件，样品出现梯状条带则样品为大肠杆菌阳性，样品不出现梯状条带则样品为大肠杆菌阴性。
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