[发明专利]一种溶藻弧菌噬菌体制剂、制备方法及其应用在审
| 申请号: | 201810313360.5 | 申请日: | 2018-04-09 |
| 公开(公告)号: | CN108651522A | 公开(公告)日: | 2018-10-16 |
| 发明(设计)人: | 罗鹏;卢泽禹;田雨顺;云龙;朱婉君 | 申请(专利权)人: | 广州诺晶生物技术有限公司 |
| 主分类号: | A01N63/00 | 分类号: | A01N63/00;A01N1/00;A61K35/76;A61P31/04;A61P31/02 |
| 代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 宋静娜;郝传鑫 |
| 地址: | 510000 广东省广州市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 噬菌体制剂 溶藻弧菌 噬菌体 制备 海水养殖动物 水产养殖业 毒副作用 水体环境 消毒制剂 新型绿色 海藻糖 宿主菌 辅剂 可用 抗生素 施用 应用 感染 平衡 健康 开发 | ||
1.一种溶藻弧菌噬菌体制剂,其特征在于,包括噬菌体Vp670和辅剂,所述辅剂包括海藻糖。
2.根据权利要求1所述的溶藻弧菌噬菌体制剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将溶藻弧菌菌液与噬菌体Vp670培养液混合,形成混合培养液,摇动培养3~5h;
(2)在步骤(1)中的混合培养液加入氯仿,氯仿与混合培养液的体积比为0.05%~0.1%,摇动培养10~15min后;
(3)过滤培养液;
(4)在步骤(3)的滤液中加入海藻糖,充分混匀,海藻糖与滤液的质量比为0.2%~0.4%,得到所述的噬菌体制剂。
3.根据权利要求2所述的溶藻弧菌噬菌体制剂的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中,包括以下步骤:
1)采用LB培养基过夜培养溶藻弧菌E06333,将过夜培养的溶藻弧菌E06333按1%的体积比例接种至新的LB培养基中,培养至OD600nm为0.4,获得溶藻弧菌液;
2)取溶藻弧菌液和噬菌体Vp670种子液按24:1的体积比混匀,30℃摇床培养3小时,离心后取上清,获得噬菌体Vp670一级培养液;
3)将噬菌体Vp670一级培养液按1%的体积比与溶藻弧菌液混匀,30℃摇床培养3小时,获得噬菌体Vp670二级培养液;
4)以VAM培养基过夜培养溶藻弧菌E06333,培养温度30℃;
5)将步骤4)的溶藻弧菌E06333培养液按1%的体积比加入到新的VAM培养基中,30℃培养至OD600nm为0.4~0.6;
6)将噬菌体Vp670二级培养液按2%~5%的体积比加入到步骤5)的溶藻弧菌E06333培养液中,30℃摇动培养3~5小时,得到混合培养液。
4.根据权利要求2所述的溶藻弧菌噬菌体制剂的制备方法,其特征在于,所述步骤(4)中,海藻糖与滤液的质量比为0.3%。
5.根据权利要求1所述的溶藻弧菌噬菌体制剂或根据权利要求2~4任一项所述方法制备得到的溶藻弧菌噬菌体制剂在水产养殖中裂解溶藻弧菌的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述应用包括用于水体除菌、用于养殖动物体表除菌中的至少一种。
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