[发明专利]一种抗氯丙那林单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用

权利要求书

1.一种抗氯丙那林单克隆抗体杂交瘤细胞株，已于2017年9月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.14689，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.由权利要求1所述的抗氯丙那林单克隆抗体杂交瘤细胞株CGMCC No.14689分泌的单克隆抗体。

3.权利要求2所述的单克隆抗体在检测食品中氯丙那林残留物方面的应用。

4.权利要求2所述的单克隆抗体在检测水体中氯丙那林残留物方面的应用。

5.权利要求2所述的单克隆抗体在在制备ELISA竞争法检测氯丙那林残留物方面的应用。

6.一种氯丙那林的检测方法，其特征在于，所述方法包括：含有包被抗原的固相载体的制备，孵育和检测；所述含有包被抗原的固相载体的制备是合成的氯丙那林包被原包被至固相载体上；孵育是将所述单克隆抗体与待测样品充分结合，再加入酶标抗体；所述检测是加入显色底物，检测OD₄₅₀下的吸光值。

7.一种制备权利要求1所述的抗氯丙那林单克隆抗体杂交瘤细胞株的方法，其特征在于，将氯丙那林抗原化，再将氯丙那林的完全抗原与等量弗氏佐剂混合乳化，免疫小鼠，取高效价，低IC₅₀的免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，经过ELISA检测，筛选亚克隆获得杂交瘤细胞。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述半抗原合成的步骤是：

将化合物1溶于酒精，并与H₂SO₄混合，用有机气体萃取、洗涤，经干燥蒸发得到化合物2；将化合物2加入到含乙氯酸和氯化铝的二氯甲烷中，搅拌，冰浴并用DCM萃取，有机层用盐水洗涤，干燥、蒸发得到化合物3；向化合物3中加入NBS，搅拌后加入水，并用有机溶剂萃取，将有机层浓缩、纯化获得化合物4；将化合物4溶于二氯甲烷中，加入异丙胺，并搅拌、冰浴，并用DCM萃取，再经盐水洗涤。干燥蒸发得到化合物5；将化合物5溶于甲醇中，加入硼氢化钠并搅拌2，再向化合物中加入水并用有机溶剂萃取、浓缩、纯化得到化合物6；将化合物6溶于四氢呋喃溶液，加入LiOH并搅拌，经真空浓缩，得到化合物JNDX-3-LR。

9.含有权利要求2所述单克隆抗体的检测试剂或检测试剂盒。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，含有杂交瘤细胞CGMCC No.14689分泌的单克隆抗体，包被于固相载体上的抗原，能与检测抗原结合的酶标抗体，显色底物，洗涤液和封闭液；所述抗原为氯丙那林包被原。