[发明专利]一种钌配合物、钌-RGD肽偶联物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种钌配合物、钌‑RGD肽偶联物及其制备方法和应用。所述的偶联物由钌配合物(RuM)和RGD肽(RGDfK)两部分偶联合成得到。其中钌配合物RuM的通式为：[Ru(dmp)₂(X‑COOH)](PF₆)₂，其中X代表的配体为：1,2‑二甲基‑1H‑咪唑[4,5‑f][1,10]菲啰啉。RGD肽为商品化试剂(RGDfK，上海强耀生物)。偶联物RuM‑RGD由钌配合物RuM和RGD肽RGDfK经缩合反应所得。本发明的RuM‑RGD偶联物，对胶质瘤细胞U87具有强的抑制作用，能够蓄积在U87肿瘤细胞的线粒体并抑制肿瘤细胞增殖，可作为新的以肿瘤细胞线粒体为靶点的抗肿瘤药物。

技术领域

本发明公开的是一种钌配合物，以及一种可以靶向U87肿瘤细胞线粒体的钌-RGD肽偶联物RuM-RGD的制备及应用，所公开的偶联物可作为新的以U87肿瘤细胞线粒体为靶点的抗肿瘤药物

背景技术

钌(Ruthenium)配合物和其它金属抗癌药物相比，具有更高的细胞毒性和更小的毒副作用，呈现出广阔的发展前景，尤其是三种钌配合物已经进入Ⅱ期(NAMI-A)或Ⅰ期(KP1019和NKP1339)临床研究，所以对钌配合物进行各种修饰设计，以期能够进一步增强其抗肿瘤活性及靶向性已成为国内外的研究热点(Mini Rev.Med.Chem.,16:787-95,2016.)。最近Simone Fulda等提出了一个抗肿瘤药物新的设计方向：线粒体靶向抗癌药物。肿瘤细胞与正常细胞的线粒体无论在结构上还是功能上都存在较大差异，主要表现在线粒体能量代谢、膜电位及通透性、线粒体内ROS水平等几方面，肿瘤细胞由于发生较为广泛的变异而更容易受线粒体损伤的影响，许多研究巧妙地利用这些特点来设计和筛选新的线粒体靶向药物(Nat.Rev.Drug Discov.,9:447-464,2010.)。近年国内外学者以及本项目组研究发现某些结构的钌配合物能够靶向肿瘤细胞的线粒体(Mitochondria)，并且通过线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡，该类钌配合物大多具有一个共同的特点，对肿瘤细胞毒性与顺铂相当甚至优于顺铂，并且对顺铂耐药株肿瘤细胞有良好的杀伤效果，因此该类钌配合物有可能被开发成一种新型线粒体靶向的抗癌药。然而，虽然由于肿瘤细胞和正常细胞间的线粒体差异造成该类钌配合物对肿瘤细胞毒性大于正常细胞，但这还是不能完全避免对正常细胞的毒性，所以提高该类钌配合物的靶向杀伤能力成为需要进一步研究解决的问题(Nat.Commun.,7:12538,2016)。

将靶向性差的小分子细胞毒药物与具有肿瘤靶向识别功能的导航配体偶联，将药物主动靶向导入肿瘤部位，避免其在健康组织蓄积，可以有效地减少对正常组织或器官的损害，提高靶向抗肿瘤效果。RGD肽是一类含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp，RGD)的三肽序列的小分子寡肽，最早由Pierschbacher等在1984年首次发现报道可以作为细胞的识别配体，后来又陆续发现一些含有RGD序列的亲和力更高的线性或者环形寡肽(如RGDs，cRGDfv，cRGDfK等)都笼统称作RGD肽(J.Med.Chem.,56:1853-1864,2013)。RGD肽与在某些肿瘤细胞表面高表达的整合素αvβ3受体具有特异性的高亲和力。整合素αvβ3分子在很多恶性肿瘤细胞膜和肿瘤新生血管内皮细胞膜表面过度表达，但在正常细胞和静止休眠的上皮细胞不表达或者表达很弱，由于这种细胞间差异，整合素αvβ3已成为近年来重要的抗癌药物作用靶点。所以，RGD肽近年来成为在各种药物、分子探针、基因载体研究中广泛采用的靶向偶联配体(Mol.Pharm.,9:2961-2973,2012)。目前国际上关于RGD肽靶向偶联研究多集中在铂类抗癌药物和一些高分子载体方面，关于金属配合物尤其是钌配合物作为偶联分子的研究尚处于起步阶段。

发明内容

本发明的目的是提供一种钌配合物、钌-RGD肽偶联物及其制备方法和应用。

本发明的目的通过以下技术方案来予以实现：