[发明专利]牡蛎蛋白高F值寡肽以及其制备方法

说明书

本发明涉及一种牡蛎蛋白高F值寡肽及其制备方法。其中，牡蛎蛋白高F值寡肽包含若干如下肽段：肽段M1的序列为SEQ ID NO.1：Ser‑His‑Cys‑Ala‑Val‑Lys‑Phe‑Leu‑Tyr；肽段M2的序列为SEQ ID NO.2：Leu‑Leu‑Cys‑Thr‑Gly‑Ala‑Gln。

技术领域

本发明涉及活性肽制备技术领域，特别是涉及牡蛎蛋白高F值寡肽以及其制备方法。

背景技术

牡蛎又名海蛎子壳、左壳、左牡蛎、蛎蛤。为牡蛎科动物长牡蛎Ostrea gigasThunberg、大连湾牡蛎Ostrea talienwhanensis Crosse或近江牡蛎Ostrea rivularisGould的贝壳及软体。主产江苏、福建、广东、浙江、辽宁及山东等沿海一带。

牡蛎含有丰富的锌、铁、磷、钙、优质蛋白质、糖类、多种维生素。其味咸，性微寒，有滋阴潜阳、补肾涩精功效。牡蛎体内含有大量制造精子所不可缺少的精氨酸与微量元素锌，精氨酸是制造精子的主要成分，锌促进荷尔蒙的分泌。牡蛎则是补充这些营养素的最佳天然食物。男子常食牡蛎可提高性功能及精子的质量，对男子遗精、虚劳乏损、肾虚阳痿等有较好的效果。

高F值寡肽是一类由2-9个氨基酸以独特的方式组合成的小肽混合物，其氨基酸混合物中支链氨基酸与芳香族氨基酸质量比值远高于正常人体中的比值。在临床上，高F值寡肽的F值的高低往往与生理活性密切相关，F值高、纯度高的高F值寡肽常用来治疗肝性脑病，苯丙酮尿症，改善病人术后的营养状况等。但是，现有的高F值寡肽F值和纯度都不高，多为混合肽，且肽的氨基酸序列多处于未知，而现有制备工艺复杂，且提取率小，不便于大规模生产。

发明内容

基于此，有必要提供一种方便后续大规模合成的、制备出纯度高、肽段序列已知的牡蛎蛋白高F值寡肽。

一种牡蛎蛋白牡蛎蛋白高F值寡肽，所述牡蛎蛋白高F值寡肽包含若干如下肽段：

肽段M1的序列为SEQ ID NO.1：Ser-His-Cys-Ala-Val-Lys-Phe-Leu-Ala-Tyr；

肽段M2的序列为SEQ ID NO.2：Leu-Leu-Cys-Thr-Gly-Ala-Gln。

首次从牡蛎肉中制备出纯度高、肽段序列已知的牡蛎蛋白高F值寡肽，且上述牡蛎蛋白高F值寡肽F值高。

本申请还提供了一种牡蛎蛋白高F值寡肽的制备方法。

一种牡蛎蛋白高F值寡肽的制备方法，包括下述步骤：

前处理：将牡蛎去壳，清洗牡蛎肉去泥沙，捣碎，脱脂；

水解：将脱脂后牡蛎肉按1:1-1:1.5加入蒸馏水中，并添加蛋白酶在pH7.0-8.0条件下水解，所述蛋白酶与所述牡蛎肉的比例为800U/g-1200U/g，然后灭酶活，过滤得到滤液；

蒙脱石动态脱芳：将蒙脱石装入层析柱中，所述滤液流经装有蒙脱石的层析柱，然后干燥制得寡肽粉末A；

凝胶层析，干燥得寡肽粉末B；

高效液相色谱纯化：取乙腈和超纯水作为洗脱液进行梯度洗脱，收集洗脱液，干燥，制得牡蛎蛋白高F值寡肽。

上述牡蛎蛋白高F值寡肽的制备方法简单，省去了常规的两步法酶水解步骤。并采用蒙脱石替代活性炭进行动态脱芳，对芳香族氨基酸吸附效果好，且可以尽可能保留支链氨基酸，最终制备的牡蛎蛋白高F值寡肽F值高，且首次从牡蛎肉中制备出已知肽段序列的牡蛎蛋白高F值寡肽。

在其中一个实施例中，所述蒙脱石为颗粒状蒙脱石，蒙脱石粒径为150目-250目。

在其中一个实施例中，所述滤液在所述层析柱的流速0.6mL/min-1.2mL/min。