[发明专利]一种双抗夹心法酶免疫层析检测试剂盒及制备方法与应用

权利要求书

1.一种双抗夹心法酶免疫层析检测试剂盒，所述试剂盒包括酶免疫层析检测试纸条、样品处理液、缓冲液和缓冲液供应单元，其特征在于，

所述缓冲液包含磷酸盐缓冲液、大分子蛋白、Tween-20和Proclin300，以及过氧化氢脲、过氧化氢尿素、双氧水中的任一种；

所述磷酸盐缓冲液为pH7.4 0.1M PBS溶液；

所述大分子蛋白为BSA或OVA；

所述过氧化氢脲、过氧化氢尿素、双氧水的浓度为0.02%～0.2%W/V；

所述酶免疫层析检测试纸条包括底物垫，其上吸附有经底物垫稀释液稀释后干燥而成的酶底物，所述底物垫稀释液包括无水乙醇、pH7.4 0.1M PBS溶液以及0.5%～4%W/VPEG6000或PEG4000；

所述酶免疫层析检测试纸条包括酶标垫，其上吸附有经酶标抗体稀释液稀释后干燥而成酶标抗体，所述酶标抗体稀释液包括pH7.4 0.1M PBS溶液、以及0.5%V/V PEG4000、PEG6000或PEG8000中的任一种；

所述酶免疫层析检测试纸条包括检测线和质控线，所述检测线上固定有经固定抗体稀释液稀释的固定抗体，所述固定抗体稀释液包括pH7.4 0.1M PBS溶液、0.5%V/V海藻糖、0.1%V/V Tween-20；

酶标抗体中的单克隆抗体和固定抗体中的单克隆抗体

为CCTCC No: C2014198小鼠杂交瘤细胞3G12分泌的猪圆环病毒2型单克隆抗体3G12和CCTCC No: C2014199小鼠杂交瘤细胞2F8分泌的猪圆环病毒2型单克隆抗体2F8的任意组合；或者

为猪流行性腹泻病毒单克隆抗体PEDV-McAB2和猪流行性腹泻病毒单克隆抗体PEDV-McAB1的任意组合，所述单克隆抗体PEDV-McAB2重链可变区为SEQ ID No.1所示、轻链可变区为SEQ ID No.2所示，所述单克隆抗体PEDV-McAB1重链可变区为SEQ ID No.3所示、轻链可变区为SEQ ID No.4所示；或者

为猪传染性胃肠炎病毒单克隆抗体TGEV-3D2和猪传染性胃肠炎病毒单克隆抗体TGEV-4B4的任意组合，所述单克隆抗体TGEV-3D2重链可变区为SEQ ID No.5所示、轻链可变区为SEQ ID No.6所示，所述单克隆抗体TGEV-4B4重链可变区为SEQ ID No.7所示、轻链可变区为SEQ ID No.8所示；或者

为抗A型流感病毒核蛋白单克隆抗体IV-McAB1和抗A型流感病毒核蛋白单克隆抗体IV-McAB2的任意组合，所述单克隆抗体IV-McAB1重链可变区为SEQ ID No.9所示、轻链可变区为SEQ ID No.10所示，所述单克隆抗体IV-McAB2重链可变区为SEQ ID No.11所示、轻链可变区为SEQ ID No.12所示；或者

为CCTCC No: C201578小鼠骨髓杂交瘤细胞10B11株分泌的犬细小病毒单克隆抗体CPV-10B11和CCTCC No: C201579小鼠骨髓杂交瘤细胞10H4株分泌的犬细小病毒单克隆抗体CPV-10H4的任意组合；或者

为CCTCC No：C2015201小鼠骨髓杂交瘤细胞1G5分泌的犬瘟热病毒单克隆抗体CDV-1G5和CCTCC No：C2015202小鼠骨髓杂交瘤细胞6E11株分泌的犬瘟热病毒单克隆抗体CDV-6E11的任意组合；或者

为犬腺病毒单克隆抗体CAV-5G4和犬腺病毒单克隆抗体CAV-1A1的任意组合，所述单克隆抗体CAV-5G4重链可变区为SEQ. ID No.13所示、轻链可变区为SEQ. ID No.14所示，所述单克隆抗体CAV-1A1重链可变区为SEQ. ID No.15所示、轻链可变区为SEQ. ID No.16所示。

2.根据权利要求1所述的酶免疫层析检测试剂盒，其特征在于，所述过氧化氢脲、过氧化氢尿素、双氧水的浓度为0.05%～0.1%W/V。

3.根据权利要求1所述的酶免疫层析检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液包含pH7.40.1M PBS溶液、0.1%～0.5%V/V Tween-20、0.02%V/V Proclin300、0.05%V/V过氧化氢脲、以及0.5%～1%W/V的BSA或OVA。