[发明专利]MDCK细胞系、复制病毒的方法及其应用

权利要求书

1.一种MDCK细胞系，其保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C201857，保藏时间为2018年2月10日。

2.权利要求1所述MDCK细胞系的衍生细胞系。

3.一种复制病毒的方法，其包括：

a)培养权利要求1或2所述的细胞系并接种所要复制的病毒；

b)对细胞进行温育；和

c)当其达到足够高的滴度后分离并提纯病毒粒子；

d)可选的，在步骤c)之后，再从所述病毒粒子中分离出病毒抗原并提纯。

4.如权利要求3所述之方法，在步骤a)中，当所述细胞系生长至细胞密度为至8.0×10⁶～1.0×10⁷cells/mL时接种病毒，病毒按照MOI＝0.001～0.0001接种。

5.如权利要求3所述之方法，在步骤a)和b)中，所述培养及所述温育在全悬浮培养条件下进行。

6.如权利要求3所述之方法，在步骤a)和b)中，所述培养及所述温育所用培养基为无血清培养基。

7.如前述任一项权利要求所述之方法，所述病毒包括选自流感病毒，呼吸道合胞病毒，副流感病毒，乳多空病毒，水泡性口膜炎病毒，痘苗病毒，柯萨奇病毒，呼肠弧病毒，细小病毒，腺病毒，脊髓灰质炎病毒，麻疹病毒，狂犬病病毒和疱疹病毒。

8.如权利要求7所述之方法，所述病毒选自人流感病毒、马流感病毒、禽流感病毒、猪流感病毒或犬流感病毒；

优选的，所述禽流感病毒选自H5N1亚型Re-8株、H7N9亚型H7-Re1株。

9.前述任一项权利要求所述之方法在制备病毒疫苗中的应用。

10.如权利要求9所述之应用，所述疫苗为减毒活疫苗、全病毒灭活疫苗、亚单位疫苗、重组载体疫苗或核酸疫苗。