[发明专利]一种天然Rakicidins类化合物Rakicidin H及其提取方法有效
申请号: | 201810256080.5 | 申请日: | 2018-03-27 |
公开(公告)号: | CN108586380B | 公开(公告)日: | 2021-08-31 |
发明(设计)人: | 陈丽;赵薇;江宏磊;周剑;林风;江红;连云阳 | 申请(专利权)人: | 福建省微生物研究所 |
主分类号: | C07D273/00 | 分类号: | C07D273/00;C12P17/00;A61K31/395;A61P31/04;A61P35/00;C12R1/29 |
代理公司: | 北京东方芊悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11591 | 代理人: | 彭秀丽 |
地址: | 350007 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 天然 rakicidins 化合物 rakicidin 及其 提取 方法 | ||
1.一种天然Rakicidins类化合物Rakicidin H的制备方法,其特征在于,
所述化合物Rakicidin H具有如下式(Ⅰ)所示的结构:
所述Rakicidin H是由保藏编号为CGMCC No.12132的小单孢菌菌株FIM02-523经发酵及分离获得,具体包括如下步骤:
(1)取保存的小单孢菌菌株FIM02-523进行发酵,收集发酵液固液分离获得菌丝体;将所得菌丝体用甲醇或乙醇浸泡,收集浸泡液;
(2)将所得浸泡液以HP20大孔树脂吸附柱进行层析,并分别以60%和68%的乙醇-水进行梯度洗脱,收集68%乙醇-水洗脱液;
所述HP20大孔树脂吸附柱的径高比为1:5-1:10,装柱体积2.5-4.0L,吸附流速为30-45ml/min;
(3)将收集的洗脱液以D3502树脂吸附柱进行层析,并分别以62%和67%的乙醇-水进行梯度洗脱,收集67%乙醇-水洗脱液;
所述D3502树脂吸附柱径高比为1:5-1:8,装柱体积2.2-3L,吸附流速为25-35ml/min;
(4)将收集的洗脱液以HZ816树脂吸附柱进行层析处理,分别以63%和66%乙醇-水进行梯度洗脱,收集含有Rakicidin H的66%的乙醇-水洗脱液;
所述HZ816树脂吸附柱的径高比为1:6-1:10,装柱体积1.5-2.2L,吸附流速为15-20ml/min;
(5)以乙酸乙酯或二氯甲烷萃取洗脱液,浓缩获得粗品用甲醇溶解,进行半制备液相色谱分离,并以体积比650:350的乙腈-水进行洗脱,分段收集,即得。
2.根据权利要求1所述的制备所述天然Rakicidins类化合物Rakicidin H的方法,其特征在于,所述步骤(5)中,所述半制备液相色谱为Welch Material,5μm,250mm×10mm,控制洗脱液流速8ml/min。
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