[发明专利]曲咪新乳膏中硫酸新霉素组分的HPLC检测方法

说明书

本发明属于化学检测领域，具体涉及一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素组分的HPLC检测方法，包括（1）色谱条件与系统适用性试验（2）溶液制备（3）测定等步骤。本发明曲咪新乳膏中硫酸新霉素组分的HPLC检测方法，该方法操作简单，检测效率高，误差小，专属性强，检验方法较稳定，受影响的因素较少，适用性广；该方法的准确度、精密度、专属性、检出限等均符合方法学验证要求，具有很强的实用性，采用该方法对各个企业生产的曲咪新乳膏中硫酸新霉素组分进行检测，能够快速准确的检测出硫酸新霉素各组分含量，从而有利于对各个企业生产的曲咪新乳膏样品进行判定。

技术领域

本发明属于化学检测领域，具体涉及一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素组分的HPLC检测方法。

背景技术

曲咪新乳膏为皮肤外用复方制剂，具有很强的抗真菌作用，在临床上主要用于治疗皮肤湿疹、接触性皮炎、脂溢性皮炎、体癣、股癣以及手足癣等，曾用名有脚癣净霜剂、皮康霜。曲咪新乳膏为我国自主研发产品，属于非基本药物，最早由广东华润顺峰药业有限公司研发生产，1985年获得批文上市销售。由于其治疗效果显著，目前在临床上已被广泛使用，其主成分为：硝酸咪康唑、醋酸曲安奈德和硫酸新霉素。

硫酸新霉素（Neomycin sulfate）是曲咪新乳膏的主成分之一，是多组分氨基糖苷类抗生素，对葡萄球菌属、棒状杆菌属有良好的抑菌作用，对大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属等肠杆菌科细菌亦有良好作用。硫酸新霉素是首个被发现的氨基糖苷类抗生素，它是1949年Waksman等从新霉素链霉菌代谢产物中分离得到的混合物，其主要成分为新霉素B和C，新霉素A（新霉胺）是新霉素B、C的降解产物之一。曲咪新乳膏的现行标准中，《国家药品标准》化学药品地方标准上升国家标准第二册，不控制硫酸新霉素的含量；国家食品药品监督管理局标准YBH16902004和YBH20102006采用效价法测定硫酸新霉素的含量，然而采用效价法测定曲咪新乳膏中硫酸新霉素的含量较为费时费力，而且这两个标准中效价法的适用性还需进一步考察。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术存在的不足而提供的一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素组分的HPLC检测方法，采用该方法对曲咪新乳膏中硫酸新霉素的组分进行测定，操作简单，检测效率高，误差小，专属性强，检验方法较稳定，适用性广，能有效的控制曲咪新乳膏的质量。

为实现上述目的，本发明采用如下的技术方案：

一种曲咪新乳膏中硫酸新霉素组分的HPLC检测方法，包括以下步骤：

（1）色谱条件与系统适用性试验：

用亲水性十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱：Waters Xselect HSS T3柱，4.6×250mm，5μm或等效柱，流动相：0.15mol/L的三氟乙酸溶液，流速：1ml/min，进样量：20μl，柱温：30℃，检测器雾化温度：45℃，新霉素C相对于新霉素B的保留时间为0.85-0.95（约为0.9），新霉素C与主峰新霉素B之间的分离度不低于3.0；

（2）溶液制备：

①供试品溶液制备：称取本品0.5g，精密称定，置分液漏斗中，加二氯甲烷25ml，振摇使乳膏基质分散，再精密加水20ml，振摇提取三分钟后静置分层，吸取上层水溶液，7000转/min离心10分钟后，用0.45μm的滤膜过滤，即得供试品溶液；

②标准曲线溶液的制备：精密称取硫酸新霉素标准品约25mg，置50ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品储备溶液，精密量取对照品储备液1、1.5、2、2.5、3ml，分别置10ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得标准曲线溶液1～5；

（3）测定:分别精密量取供试品溶液和标准曲线溶液各20ul注入液相色谱仪，照上述的色谱条件测定，记录色谱图至主峰保留时间的2倍，按标准品组分，用标准曲线法计算各组分相对含量。