[发明专利]一株高产乙偶姻细菌的选育与生产

权利要求书

1.一种产乙偶姻菌株的选育方法，包括以下步骤：

从校园果树下取表面约3cm厚的土壤10g，80℃烘箱中烘24h，溶解于90mL无菌水中制成悬液，以此菌悬液作为母液梯度稀释至10^-8，取10^-6、10^-7、10^-8的稀释菌悬液接种于LB液体培养基，在37℃、150r/min的摇床上培养12-24h；将富集得到的菌液梯度稀释至10^-8，取10^-6、10^-7、10^-8的稀释菌悬液涂布到筛选培养基上，在37℃培养箱中培养24h；观察培养基平板上长出的菌落，并依菌落外观做大致分类，挑取不同形态的菌落在筛选培养基上进行平板划线分离，直至得到单菌落为止；挑取单菌落于种子培养基中在37℃摇床上培养12h后行V-P实验，将阳性菌株接种到初始发酵培养基中，培养24h后用分光光度法于520nm处测定乙偶姻产量，其中编号LXF04菌株产量最高。

2.根据权利要求1所述一种产乙偶姻菌株的选育方法，筛选得到的菌株经生理生化鉴定为解淀粉芽胞杆菌，并命名为Bacillus amyloliquefaciens LXF04。

3.一种乙偶姻的生产方法，其特征是采用Bacillus amyloliquefaciens LXF04为出发菌株，以种子培养和发酵培养生产乙偶姻。

4.（1）种子培养

培养条件为：温度37℃，pH7.5，摇床转速175rpm，培养24h；

培养基以g/L计：葡萄糖60，蛋白胨5，酵母粉10，KH₂PO₄ 0.5，乙酸钠2.4；

（2）发酵培养

发酵条件：接种量5%（v/v），温度37℃，pH7.5，摇床转速175rpm，培养60-70h；

发酵培养基以g/L计：葡萄糖77.8g/L、蛋白胨5g/L、酵母粉22.8g/L、NaCl 0.05g/L、MgSO₄ 0.05g/L、KH₂PO₄ 0.1g/L和乙酸钠2.4g/L。