[发明专利]抗抑制性木聚糖酶的克隆、表达及其应用在审

专利信息
申请号: 201810214903.8 申请日: 2018-03-15
公开(公告)号: CN108424923A 公开(公告)日: 2018-08-21
发明(设计)人: 刘新育;朱东东;陈红歌;王秋菊;胡虹 申请(专利权)人: 河南农业大学
主分类号: C12N15/56 分类号: C12N15/56;C12N9/24;C12N15/11
代理公司: 河南科技通律师事务所 41123 代理人: 樊羿;张晓辉
地址: 450002 河*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 木聚糖酶 抑制性 克隆 应用 核苷酸序列 表达载体 蛋白序列 面粉加工 严格条件 遗传密码 抑制蛋白 引物序列 重组宿主 互补链 简并性 宿主菌 抗性 构建 杂交
【权利要求书】:

1.一种编码抗抑制性木聚糖酶的核酸序列,其DNA序列选自:

a):含有SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的DNA序列,或

b):编码SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的DNA序列,或

c):在严格条件下可与a)或b)的DNA序列杂交的DNA序列,或

d):由于遗传密码的简并性而与a)、b)或c)中DNA序列相关的DNA序列,或

e):a)、b)、c)或d)中DNA序列的互补链。

2.一种扩增权利要求1所述编码抗抑制性木聚糖酶的核酸序列的引物序列,其为SEQID NO.3所示或SEQ ID NO.4所示。

3.一种含有权利要求1所述DNA序列的表达载体。

4.一种由权利要求3所述表达载体转化而得的重组宿主菌。

5.一种由权利要求1所述核酸序列编码、权利要求3所述表达载体表达或权利要求4所述重组宿主菌分离的抗抑制性木聚糖酶。

6.权利要求5所述抗抑制性木聚糖酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)构建权利要求1所述核酸序列的重组表达载体;

(2)将重组表达载体导入宿主菌构建重组宿主菌;

(3)发酵培养重组宿主菌后,离心收集菌体;

(4)破碎菌体,离心后收集上清液,得粗酶液;

(5)利用亲和层析纯化粗酶后,得抗抑制性木聚糖酶。

7.权利要求5所述抗抑制性木聚糖酶在抗XIP-I型抑制蛋白中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述木聚糖酶的酶反应温度控制为40℃~70℃。

9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述木聚糖酶的酶反应pH控制为3.0~7.0。

10.权利要求5所述抗抑制性木聚糖酶在面粉加工领域中的应用。

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