[发明专利]抗抑制性木聚糖酶的克隆、表达及其应用在审
| 申请号: | 201810214903.8 | 申请日: | 2018-03-15 |
| 公开(公告)号: | CN108424923A | 公开(公告)日: | 2018-08-21 |
| 发明(设计)人: | 刘新育;朱东东;陈红歌;王秋菊;胡虹 | 申请(专利权)人: | 河南农业大学 |
| 主分类号: | C12N15/56 | 分类号: | C12N15/56;C12N9/24;C12N15/11 |
| 代理公司: | 河南科技通律师事务所 41123 | 代理人: | 樊羿;张晓辉 |
| 地址: | 450002 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 木聚糖酶 抑制性 克隆 应用 核苷酸序列 表达载体 蛋白序列 面粉加工 严格条件 遗传密码 抑制蛋白 引物序列 重组宿主 互补链 简并性 宿主菌 抗性 构建 杂交 | ||
1.一种编码抗抑制性木聚糖酶的核酸序列,其DNA序列选自:
a):含有SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的DNA序列,或
b):编码SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的DNA序列,或
c):在严格条件下可与a)或b)的DNA序列杂交的DNA序列,或
d):由于遗传密码的简并性而与a)、b)或c)中DNA序列相关的DNA序列,或
e):a)、b)、c)或d)中DNA序列的互补链。
2.一种扩增权利要求1所述编码抗抑制性木聚糖酶的核酸序列的引物序列,其为SEQID NO.3所示或SEQ ID NO.4所示。
3.一种含有权利要求1所述DNA序列的表达载体。
4.一种由权利要求3所述表达载体转化而得的重组宿主菌。
5.一种由权利要求1所述核酸序列编码、权利要求3所述表达载体表达或权利要求4所述重组宿主菌分离的抗抑制性木聚糖酶。
6.权利要求5所述抗抑制性木聚糖酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)构建权利要求1所述核酸序列的重组表达载体;
(2)将重组表达载体导入宿主菌构建重组宿主菌;
(3)发酵培养重组宿主菌后,离心收集菌体;
(4)破碎菌体,离心后收集上清液,得粗酶液;
(5)利用亲和层析纯化粗酶后,得抗抑制性木聚糖酶。
7.权利要求5所述抗抑制性木聚糖酶在抗XIP-I型抑制蛋白中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述木聚糖酶的酶反应温度控制为40℃~70℃。
9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述木聚糖酶的酶反应pH控制为3.0~7.0。
10.权利要求5所述抗抑制性木聚糖酶在面粉加工领域中的应用。
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