[发明专利]制备化合物的方法

说明书

本发明涉及化合物合成方法的改进领域，公开了一种制备化合物的方法。该方法包括：使式(I)、式(II)或式(III)所示线性化合物进行偶联反应，本发明公开的制备环二核苷酸及其类似物的方法具有高效、易操作、条件温和、低成本的优点。

技术领域

本发明涉及化合物合成方法的改进，具体涉及一种制备化合物的方法。

背景技术

环二核苷酸是一种普遍存在于细菌中的第二信使分子。目前已经报道了有c-di-GMP(3’-5’)、c-di-AMP(3’-5’)、cGAMP(3’-5’)这三种细菌来源的环二核苷酸，其都参与调节细菌多种重要的生理活动，包括细胞的分化，生物膜的生成、细胞壁的代谢平衡、细菌的趋化性、细菌的致病因子的产生以及细菌的毒力等。cGAMP(2’-3’)是在真核细胞中首次发现一种新型结构的环二核苷酸，其在免疫通道中扮演着重要的免疫刺激作用。后续的研究发现包括细菌来源和人工合成的环二核苷酸也同样都可以有效刺激免疫反应，并因此建立了一种基于环二核苷酸为免疫佐剂或者免疫刺激剂的治疗方案，其在抗癌、抗病毒、抗菌中都表现出良好的应用前景。

环二核苷酸表现出巨大的潜在药用价值，因此对环二核苷酸及其类似物的合成也成为一个重要的研究内容。目前主要集中在酶工程生物合成、磷酸三酯、亚磷酰胺和氢磷酸几种方法。CN106190999A和CN102245774A提供的酶法虽然可以大规模制备环二核苷酸，但限于酶催化的特异性，无法得到其结构修饰的类似物，因此其很难得到推广应用。CN102199183A和WO2016120305A提供的亚磷酰胺和氢磷酸方法同样可以以较高产率合成得到环二核苷酸及其类似物，但其反应条件苛刻，其对溶剂要求绝对无水(一般需要将所用的溶剂用干燥剂(例如氢化钙)干燥过夜后，蒸馏得到无水溶剂，而且反应的过程中需要在惰性气体氛围保护下进行)，同时由于制备过程中中间体以盐的形式存在，导致其易吸水，不易纯化，且中间体稳定性差，因此在制备过程中增加了对操作的难度，而且在中间体核苷的亚磷酰胺单体的制备过程中所需的三价磷试剂价格高昂，增加了制备成本。因此如何大量制备环二核苷酸及其类似物依旧是需要解决的问题。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术存在的合成环二核苷酸及其类似物过程中的纯化不易、反应条件苛刻和中间体不稳定等问题，提供了一种制备化合物的方法。

为了实现上述目的，本发明一方面提供了一种制备化合物的方法，该方法包括：使式(I)、式(II)或式(III)示线性化合物进行偶联反应，

其中：B₁、B₂、B₃、B₄、B₅和B₆各自独立地为环外氨基被保护的鸟嘌呤基、环外氨基被保护的腺嘌呤基、环外氨基被保护的腺嘌呤基、环外氨基被保护的胸腺嘧啶基、尿嘧啶基或环外氨基被保护的人工修饰的碱基；

X₁、X₂、X₃、X₄、X₅和X₆各自独立地为叔丁基二甲基硅甲烷基、苯基二甲基硅甲烷基、叔丁基二苯基硅甲烷基或三异丙基硅甲烷基；

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅和R₆各自独立地为其中R为卤素原子、硝基或甲氧基。

通过上述技术方案，本发明制备环二核苷酸及其类似物在保持较高产率(产率为23-25％)的同时，所用的无水溶剂均按照常规方法干燥即可，不需要绝对无水，另外反应的中间体产物稳定性好，所使用的试剂均为常规试剂，成本较低，因此本发明公开的制备环二核苷酸及其类似物的方法具有高效、易操作、条件温和、低成本的优点。