[发明专利]一种刺五加总黄酮注射液及从五加参中提取刺五加总黄酮的方法

权利要求书

1.一种从五加参中提取刺五加总黄酮的方法，其特征在于所述提取方法步骤如下：

步骤a、五加参原料预处理：

a1：选取新鲜的五加参原料，清洗干净后将其置于60～65℃真空干燥箱中干燥10～15h，将充分干燥后的五加参原料粉碎至50～100目；

a2：向步骤a1得到的五加参粉末中加入石油醚，所述五加参粉末与石油醚的质量体积比为1g:5～10mL，回流提取2-3h后过滤除去滤液，将滤渣放入50℃真空干燥箱中干燥30min使溶剂挥发，得到已除去叶绿素中脂溶性杂质的脱脂五加参粉末；

步骤b、高压提取脱脂五加参粉末中的刺五加总黄酮：

b1：向步骤a2得到的脱脂五加参粉末中加入40％乙醇溶液，所述脱脂五加参粉末与40％乙醇溶液的质量体积比为1g:15～20mL，常温下浸泡2～3h待用；

b2：将步骤b1得到的浸泡有脱脂五加参粉末的乙醇溶液装入耐压的塑料袋中，密封后放入高压提取装置的提取容器中；

b3：常温下在10～15min内将高压提取装置内的压强升高至300～600Mpa，保压15～25min后在10～20s内将高压提取装置内的压强泄为常压；

b4：重复b3的操作3～5次后，将塑料袋从高压提取装置的提取容器中取出，将物料过滤除去滤渣，将滤液置于3000～5000rmp离心转速下离心10～30min，取上清液重复离心1次，上清液浓缩即为刺五加总黄酮粗提液；

步骤c、分离纯化刺五加总黄酮：

c1：将步骤b4得到的刺五加总黄酮粗提液pH值调至中性后使其通过弱极性或非极性色谱柱进行吸附；

c2：将水或能与水以任意比例相溶的低浓度有机溶剂pH值调至中性并以此为第1洗脱溶剂进行洗脱；将能与水以任意比例相溶的高浓度的有机溶剂pH值调至中性并以此为第2洗脱溶剂进行洗脱，收集含有刺五加总黄酮成分的馏分；

c3：将步骤c2得到的含有刺五加总黄酮成分的馏分进行减压浓缩，喷雾干燥，得到纯化后的刺五加总黄酮提取物。

2.根据权利要求1所述一种从五加参中提取刺五加总黄酮的方法，其特征在于步骤a1所述新鲜的五加参原料为五加参叶、五加参花、五加参果实、五加参茎和五加参根中的一种或几种，优选五加参花或五月份新生的五加参嫩叶。

3.根据权利要求1所述一种从五加参中提取刺五加总黄酮的方法，其特征在于步骤c1所述弱极性或非极性色谱柱为聚酰胺树脂色谱柱或大孔吸附树脂色谱柱，所述大孔吸附树脂色谱柱中大孔吸附树脂型号为D101、HPD-100、AB-8、X-5、NKA-9中的一种。

4.根据权利要求1所述一种从五加参中提取刺五加总黄酮的方法，其特征在于步骤c1所述弱极性或非极性色谱柱为聚酰胺树脂与大孔吸附树脂联合色谱柱，其中聚酰胺树脂与大孔吸附树脂的装料重量比为1:3，装料方式为聚酰胺树脂在色谱柱上层，大孔吸附树脂在色谱柱下层，所述大孔吸附树脂的型号为D101、HPD-100、AB-8、X-5、NKA-9中的一种。

5.根据权利要求1所述一种从五加参中提取刺五加总黄酮的方法，其特征在于步骤c2所述低浓度有机溶剂为0～20％甲醇溶液、0～20％乙醇溶液或0～20％丙酮溶液中的一种；所述高浓度有机溶剂为20～60％甲醇溶液、20～60％乙醇溶液或20～60％丙酮溶液中的一种，或由甲醇、乙醇和丙酮按照任一比例所组成的浓度为20～60％的混合有机溶剂。

6.一种基于权利要求1-5任一提取方法得到的刺五加总黄酮提取物制备的刺五加总黄酮注射液，其特征在于所述刺五加总黄酮注射液是由刺五加总黄酮提取物制备的灭菌水溶液，每毫升注射液中刺五加总黄酮的含量为2～5mg/mL，钾离子的含量≤500μg/mL。