[发明专利]一种从动物体提取肝素钠的方法在审
| 申请号: | 201810189159.0 | 申请日: | 2018-03-08 |
| 公开(公告)号: | CN108314749A | 公开(公告)日: | 2018-07-24 |
| 发明(设计)人: | 李海生 | 申请(专利权)人: | 广元市海鹏生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C08B37/10 | 分类号: | C08B37/10 |
| 代理公司: | 成都弘毅天承知识产权代理有限公司 51230 | 代理人: | 蒋秀清 |
| 地址: | 628000 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 肝素钠 树脂清洗 物体提取 除杂 脱附 吸附 盐解 沉淀 | ||
1.一种从动物体中提取肝素钠的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)盐解:将用于提取肝素钠新鲜小肠粘膜绞碎,按水与绞碎的小肠粘膜重量比为5.5:1的配比向绞碎的小肠粘膜中加入水混合均匀,并加入盐或盐水调节盐度为6.2度,再加入NaOH溶液调节pH至9.5-9.7,先升温至50-55℃,保温2h,而后升温至92-95℃,保温10-12min,捞出残渣并收集作为饲料,剩下混合液;
(2)吸附:用130-150目双层纱布过滤步骤(1)中所述的混合液,并将得到的滤渣按步骤(1)进行二次提取,将两次所得滤液进行合并在一起,并加入清水调节盐度2.6-2.8度,调节pH为8.3-8.7,控制温度为55-58℃,加入预处理好的树脂,进行搅拌吸附,搅拌时间为5-7h,其中所用树脂为德国肝素钠树脂WD-1701,使用重量比为树脂:小肠为1-1.2:60;
(3)树脂清洗:将步骤(2)所述的经树脂吸附后的溶液收集起来,作为下次步骤(1)中代替溶解小肠粘膜水,收集步骤(2)所述用于吸附后的树脂,并用自来水清洗至无粘膜杂质为止;
(4)脱附:将步骤(3)所述的清洗后的树脂按1:1的配比浸入盐度为24-25度的盐水中,并控制温度在45-50℃,搅拌3-4h后收集一次洗脱液,并调节一次洗脱液盐度为19-21度;将一次洗脱后的树脂按1:1的配比浸入18.5-19度的盐水中,温度控制在45-50℃,搅拌3-4h收集二次洗脱液,调节二次洗脱液盐度为19-21度;
(5)除杂:将步骤(4)中所述的一次洗脱液及二次洗脱液进行合并,并加入NaOH溶液将pH调节至10-11,静置沉淀20-22h,抽出上层药液,并用120-130目双层纱布进行过滤,得到清液;
(6)沉淀:将步骤(5)中所述的除杂后的清液加入盐酸调节pH至7.0-7.3,加入80%以上乙醇进行沉淀直至酒精计测测酒精度为10-11%,酒精需快搅慢加,并封存24-40h,得到的下层浆糊即为糊状肝素钠;
(7)干燥:将步骤(6)所述的糊状肝素钠加入沉淀物体积90%的酒精,静置沉淀21-22h,滤去上部酒精,并在55-58℃进行烘干至恒重,得到粗品肝素钠。
2.如权利要求1所述的一种从动物体中提取肝素钠的方法,其特征在于,当步骤(2)中所述吸附进行3.5-4h时,再次加入重量比为树脂:小肠为0.2-0.4:100的树脂进行二次吸附。
3.如权利要求1所述的一种从动物体中提取肝素钠的方法,其特征在于,将步骤(4)中所述的二次洗脱后的树脂浸入盐度为15-16度的盐水中,控制温度为45-50℃,搅拌3-4h收集三次洗脱液,并调节三次洗脱液盐度为24-25度,将三次洗脱液用于下次生产时进行第一次洗脱时用。
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