[发明专利]一种羟基红花黄色素A的制备方法

权利要求书

1.一种羟基红花黄色素A的制备方法，其特征在于，包括步骤：

(a)提供羟基红花黄色素A粗品C的溶液，对所述的溶液进行柱层析纯化，得到羟基红花黄色素A；

其中，所述的柱层析使用的洗脱剂为5-15％体积分数的乙醇水溶液；

其所述的羟基红花黄色素A粗品C中，羟基红花黄色素A的含量＞30wt％；

所述步骤(a)中，所述的溶液通过将羟基红花黄色素A粗品C用去离子水溶解得到；

所述步骤(a)中，所述柱层析步骤中使用的层析柱中的填料为葡聚糖凝胶填料，所述的葡聚糖凝胶填料选自下组：Sephadex G50、Sephadex LH20，或其组合；

所述步骤(a)中，所述的羟基红花黄色素A粗品C与柱层析使用的层析柱中的填料重量比为1:8-15；

所述步骤(a)中，所述的柱层析使用的层析柱的径高比为1:10-25；

所述步骤(a)中，所述洗脱剂的洗脱速度为3-10ml/min；

所述羟基红花黄色素A粗品C通过以下方法制备：

(b)对含有羟基红花黄色素A的粗品B的溶液进行柱层析，分离得到所述羟基红花黄色素A粗品C；

所述的溶液通过将羟基红花黄色素A的粗品B溶液溶于去离子水中得到；

所述步骤(b)中，所述的柱层析采用反相层析填料柱进行；

所述步骤(b)中，所述反相层析填料柱的填料为十八烷基硅烷键合硅胶C18填料；

所述在步骤(b)中，所述的柱层析中，所述的粗品B与所述柱层析使用的层析柱中的填料的重量比为1:4-10；

所述步骤(b)中，所述的柱层析步骤中，使用的洗脱剂为5-20％体积分数的乙醇水溶液；

所述步骤(b)中，所述柱层析包括步骤：收集羟基红花黄色素A浓度大于30％的洗脱液；

所述含有羟基红花黄色素A的粗品B通过以下方法制备：

(c)对红花水提物进行大孔树脂柱柱层析，分离得到羟基红花黄色素A的粗品B，所述的大孔树脂柱的填料为XDA-8型大孔树脂填料；

所述步骤(c)中，所述的柱层析包括步骤：洗脱先用水洗脱4-6倍柱体积，再用50-70％体积分数的乙醇水溶液进行洗脱；

所述步骤(c)中，所述的分离包括步骤：对所述柱层析得到的洗脱液进行减压浓缩；

所述步骤(c)中，所述的红花水提物与柱层析使用的层析柱中的填料重量比为2-10:1；

所述的红花水提物是通过以下方法制备的：

(d)用去离子水对红花药材进行提取，得到红花水提取物；

所述步骤(d)中，所述的红花药材与去离子水的重量比例为1:10-25；

所述步骤(d)中，所述的红花水提物的相对密度为1.17-1.45；

所述步骤(d)中，所述方法还包括步骤：对所述红花药材进行浸泡，所述浸泡的温度为18-40℃，所述浸泡的时间为12-24h。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(a)中，所述的葡聚糖凝胶填料为Sephadex LH20；所述的柱层析使用的层析柱的径高比为1:25；所述洗脱剂的洗脱速度为10ml/min。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述在步骤(b)中，所述的柱层析中，所述的粗品B与所述柱层析使用的层析柱中的填料的重量比为1:10；使用的洗脱剂为20％体积分数的乙醇水溶液。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述步骤(c)中，所述的柱层析包括步骤：洗脱先用水洗脱4倍柱体积，再用50％体积分数的乙醇水溶液进行洗脱；所述的红花水提物与柱层析使用的层析柱中的填料重量比为2:1。

5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(a)中，所述的纯化步骤包括：在所述柱层析步骤中，对含有羟基红花黄色素A的洗脱液进行减压浓缩和干燥；所述的减压浓缩的温度为20-50℃。

6.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(b)中，所述的分离包括步骤：对所述柱层析得到的洗脱液进行减压浓缩；所述的减压浓缩的温度为30-50℃。