[发明专利]用于检测转运的生物传感器及其应用

说明书

本发明提供了用于检测转运的生物传感器及其应用。具体地，本发明的方法包括步骤：(a)提供一检测体系，其中，所述的检测体系包括：(a1)一生物传感器；(a2)一检测溶液；(b)将所述检测体系与待测物和转运抑制剂进行混合，或者将所述检测体系与待测物和转运底物进行混合，从而形成第一混合溶液；(c)任选地将所述第一混合溶液进行放置一段时间t；(d)将所述生物传感器与所述第一混合溶液进行分离，从而获得经分离的生物传感器；和(e)检测，从而获得所述待测物的转运检测结果；或获得所述待测物对转运体影响的结果。本发明操作简便、检测高效快速。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地涉及用于检测转运的生物传感器及其应用。

背景技术

物质的转运与众多生理活动有关。ATP结合盒转运体是目前研究较多的一类超家族转运体，由两个跨膜结构域及两个细胞质ATP结合域组成，其底物非常广泛，参与胆汁盐、核苷、胆固醇、肽、多种药物、氯离子、毒素、有机阴离子、铁、以及固醇等多种内源和外源性底物的转运。

目前已经发现49种人的ABC转运蛋白成员，分为七个亚家族(ABC-A至ABC-G)。一些外排型转运体往往与很多药物的耐药现象密切相关，因此，ABC转运蛋白被认为是克服肿瘤耐药治疗的重要靶标。

例如，肿瘤耐药的最主要原因之一是ATP结合盒转运蛋白超家族的成员以能量依赖的方式从细胞中泵出多种结构上不相关的抗肿瘤药物，如紫杉醇、环霉素、蒽紫杉烷、长春花生物碱等，从而降低细胞内的药物浓度，减弱药物的疗效。除了肿瘤药物之外，在许多其他药物的研究中，也需要对转运功能进行研究。

然而，目前缺乏令人满意的在体外高效准确地对生物转运功能进行检测的方法。

因此，本领域迫切需要开发能够高效而准确地对生物转运功能进行检测的方法，以满足高通量筛选的要求。

发明内容

本发明的目的就是提供一种能够高效而准确地对生物转运功能进行检测的生物传感器及其制法和应用。

在本发明的第一方面，提供了一种在体外对待测物进行转运检测的方法，所述方法包括步骤：

(a)提供一检测体系，其中，所述的检测体系包括：

(a1)一生物传感器，所述生物传感器具有一内部富集腔，以及围绕所述内部富集腔的腔体层，所述的腔体层包括多层细胞，并且所述的细胞选自下组：小肠绒毛上皮细胞、潘氏细胞、或其组合；

(a2)一检测溶液，其中所述的检测溶液中含有所述的生物传感器；

(b)将所述检测体系与待测物和转运抑制剂进行混合，或者将所述检测体系与待测物和转运底物进行混合，从而形成第一混合溶液；

(c)任选地将所述第一混合溶液进行放置一段时间t；

(d)将所述生物传感器与所述第一混合溶液进行分离，从而获得经分离的生物传感器；和

(e)检测在所述的经分离的生物传感器的内部富集腔内的所述待测物的存在与否和/或数量，从而获得所述待测物的转运检测结果；或者检测在所述的经分离的生物传感器的内部富集腔内的所述转运底物的存在与否和/或数量，从而获得所述待测物对转运体影响的结果。

在另一优选例中，在所述方法中，在步骤(b)中，将所述检测体系与待测物和转运底物进行混合，从而形成第一混合溶液；以及将所述检测体系与待测物和转运抑制剂进行混合，形成第一混合液。

在步骤(e)中，检测在所述的经分离的生物传感器的内部富集腔内的所述转运底物的存在与否和/或数量，从而获得所述待测物的转运检测结果。

在另一优选例中，所述的生物传感器是对干细胞进行定向培养而形成的。

在另一优选例中，所述的方法是非诊断性和非治疗性的。