[发明专利]一种检测维生素A棕榈酸酯中杂质的分析方法

说明书

本申请涉及一种使用HPLC法检测维生素A棕榈酸酯中脱水视黄醇、视黄醇硬脂酸酯、维生素A醋酸酯三种杂质的方法，本申请采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以5mmol/L醋酸铵溶液‑甲醇和甲醇‑异丙醇为流动相，采用梯度洗脱程序，本技术方案可以迅速、准确对脱水视黄醇、视黄醇硬脂酸酯、维生素A醋酸酯进行定性和定量分析，且分离度好，检测限和定量限都较低，线性范围较宽，为维生素A棕榈酸酯中杂质的进一步监测、研究提供了技术支持。

技术领域：本发明属于分析化学领域，具体涉及一种使用HPLC法检测维生素A棕榈酸酯中杂质的方法。

背影技术：

维生素A棕榈酸酯为黄色粘稠油状液体，储存过程中可能形成固体，属维生素类药，对空气、热、光和湿度敏感，不溶于水，溶于乙醇，易溶于乙醚、三氯甲烷、丙酮和油脂中。

具体化学结构为：

维生素A棕榈酸酯是一种重要的注射级原料药，是“注射用多种维生素(12)”、“多种维生素注射液(13)”等药品的必需原料药，维生素A棕榈酸酯对热很不稳定，自身所含杂质成分也较多，其在合成和制剂的储存过程中经常相伴出现脱水视黄醇、视黄醇硬脂酸酯、维生素A醋酸酯三种杂质。

其中脱水视黄醇分子式：C₂₀H₂₈；分子量：268.44；化学式为：(3E,5E,7E)-3,7-二甲基-9-[(1Z)-2,6,6-三甲基环己基-2-烯亚基]-1,3,5,7-壬四烯，是由烯丙型醇结构在H+下，发生脱水反应，生成的，其生物活性只有维生素A的0.4％，结构式如下：

视黄醇硬脂酸酯分子式C₃₈H₆₄O₂，分子量552.91；化学式为：(2E,4E,6E,8E)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己基-l-烯基)-2,4,6,8-壬四烯-l-硬脂酸酯，结构式如下：

维生素A醋酸酯分子式C22H32O2；分子量328.49；结构式如下：

在关于维生素A棕榈酸酯的现有技术中，CN201511027562.6一种维生素A棕榈酸酯的合成方法中公开了采用美国药典USP28的方法对合成后的维生素A棕榈酸酯进行分析，结果表明维生素A棕榈酸酯的含量88.63％。转化率90.93％(实施例2)，说明其中有大量的杂质，但并没有公开具体的杂质和相应的分析方法。

陈红丽等公开发表的HPLC法测定脂溶性维生素注射液中维生素A棕榈酸酯的有关物质的文献中没有公开上述杂质的测量方法，且维生素A棕榈酸酯的线性范围为：0.206-5.14mg/L，检测限为0.041mg/L，检测限较高，该方法灵敏度不高。

现有技术中并没有公开维生素A棕榈酸酯中关于脱水视黄醇、视黄醇硬脂酸酯、维生素A醋酸酯杂质的分析方法；且现有的维生素A棕榈酸酯原料药和其制剂药品质量标准中欧洲药典(EP)、英国药典(BP)、日本药典(JP)、美国药典(USP)中也没有明确收录有关以上三种杂质的定量和定性的方法。

发明内容：

针对以上问题，本申请主要针对维生素A棕榈酸酯中关于脱水视黄醇、视黄醇硬脂酸酯、维生素A醋酸酯三种杂质的定性和定量方法进行研究，本申请的技术方案如下：

一种检测维生素A棕榈酸酯中杂质的分析方法，采用高效液相色谱仪测定，其色谱条件为：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；

流动相A：5mmol/L醋酸铵溶液-甲醇；

流动相B：甲醇-异丙醇；

流速：0.8-1.2ml/min；