[发明专利]一种快速判定谷物内酶活力及预测酶适温度的方法有效
申请号: | 201810160767.9 | 申请日: | 2018-02-27 |
公开(公告)号: | CN108398356B | 公开(公告)日: | 2021-03-30 |
发明(设计)人: | 张晖;朱玲;齐希光;吴港城;王立;钱海峰;李言 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | G01N11/00 | 分类号: | G01N11/00 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 判定 谷物 活力 预测 温度 方法 | ||
1.一种快速测定谷物内酶活力及酶适温度的方法,其特征在于,所述方法以灭酶前后谷物的加热糊化时粘度落差程度,即峰值粘度下降的相对值作为表征酶活力和酶适温度的参数,参数越大,酶活力越高;所述酶活力是指谷物中对各组分的粘度有降低作用的酶的总称;所述酶适温度是指谷物中引起粘度降低程度最大的温度;所述各组分包括淀粉、蛋白质、脂肪、多糖中的至少一种;(1)测定谷物样品的水分含量,换算样品干基;(2)测定灭酶前后谷物样品在30~100℃下对应的粘度增长值;(3)通过寻找粘度变化过程中峰值粘度变化程度计算酶的活力,(4)通过不同温度段峰值粘度变化程度计算出酶适温度;将步骤(2)中所述样品放置于快速粘度分析测定仪中测定粘度特征谱图,根据RVA特征谱图可以得到峰值粘度、崩解值、最终粘度、回生值、峰值时间、成糊温度及面积;其中,可通过测试样相对于对照样的峰值粘度增长值来计算酶活力,即(P测试-P对照)×100/P对照,其中P表示峰值粘度;根据RVA特征谱图中的面积来计算酶的最适温度,即特征曲线所形成面积的增长最大值所对应的温度为最适温度。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,样品处理包含以下具体步骤:
(1)前处理:将谷物样品进行磨粉处理,过60-150目筛;
(2)测定样品的水分含量,在以14%为水分基础上,称取干基样品3-5g;
(3)设定酶活力测定程序及最适温度测定程序;
(4)称取25g去离子水与样品混合均匀,作为对照样;同时,称取25g酶抑制剂溶液与粉混合,作为测定样。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,酶活力测定程序如下任一所示:
程序1:60℃保温1min,12℃/min速度上升至95℃保持2.5min,随后同样的速率下降至50℃保温1.4min,搅拌速度保持在160r/min;
程序2:60℃保温5min,12℃/min速度上升至95℃保持5min,随后同样的速率下降至50℃保温3min,搅拌速度保持在160r/min。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,最适温度测定程序为:30-90℃保温5min,随后以12℃/min速度上升至95℃保持2.5min,随后同样的速率下降至50℃保温1.4min,搅拌速度保持在160r/min。
5.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述谷物包括:大米、小麦、玉米、荞麦、燕麦或藜麦,或大米、小麦、玉米、荞麦、燕麦或藜麦的淀粉提取物。
6.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,权利要求2的步骤(2)中,干基样品为淀粉提取物或全谷物份样;所述淀粉提取物的样品重量为3-4g,全谷物粉样品重量为4-5g,同批对比样品需称取相同质量或干基的样品作为对照。
7.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,权利要求2的步骤(4)中所述酶抑制剂包括:含碳-磷键的化合物、含有机基团的磷酸衍生物、硝酸银、硫酸铜、氯化铜、硫酸铁中的一种或几种的混合复配物。
8.根据权利要求2或7所述的方法,其特征在于,所述酶抑制剂的浓度为0.01-2mM。
9.权利要求1~8任一所述方法在谷物品质控制、储藏、育种、发酵及品种、产地的判定方面的应用。
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