[发明专利]一种酶活提高的羧甲基纤维素酶突变体有效
| 申请号： | 201810148124.2 | 申请日： | 2018-02-13 |
| 公开（公告）号： | CN108192887B | 公开（公告）日： | 2020-06-09 |
| 发明（设计）人： | 龙萍 | 申请（专利权）人： | 淄博职业学院 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 255314 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 羧甲基纤维素 突变体 | ||
【权利要求书】：
1.一种酶活力提高的羧甲基纤维素酶突变体，其特征在于，所述突变体是对氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的来源于哈茨木霉的羧甲基纤维素酶蛋白质内部氨基酸进行定点突变，将第21位缬氨酸替换为谷氨酸，将第96位和第135位甲硫氨酸替换为赖氨酸。
2.表达权利要求1所述羧甲基纤维素酶突变体的大肠杆菌。
3.一种酶活提高的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于，所述方法是将含有编码权利要求1所述羧甲基纤维素酶突变体的基因与表达载体连接后转化至大肠杆菌中。
4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，以pET-22b(+)为载体、以
5. 一种提高羧甲基纤维素酶活力的方法，其特征在于，将如SEQ ID NO.1所示羧甲基纤维素酶的氨基酸的第21位缬氨酸替换为谷氨酸，并将第96位和第135位甲硫氨酸替换为赖氨酸。
6. 一种生产羧甲基纤维素酶的方法，其特征在于，是将权利要求2所述的大肠杆菌接种至TB培养基中，35~37℃培养12~30 h。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，接种量按体积比为1~3%；菌体至OD600为0.6~0.8时，加入IPTG诱导。
8.权利要求1所述羧甲基纤维素酶突变体在降解纤维素方面的应用。
9.权利要求2所述大肠杆菌在降解纤维素方面的应用。
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