[发明专利]一种安全型嵌合抗原受体T细胞及其用途

说明书

本发明涉及一种安全型嵌合抗原受体T细胞及其用途，具体地，本发明提供了一种表达靶向HLA结合域的第一CAR和靶向肿瘤抗原的第二CAR。本发明的工程化免疫细胞可选择性杀伤肿瘤细胞，还可保护正常细胞免受杀伤作用。

技术领域

本发明涉及免疫治疗领域，具体地，涉及一种安全型嵌合抗原受体T细胞及其用途。

背景技术

肿瘤免疫治疗被认为是继手术、放疗、化疗后的第四种肿瘤治疗方式，细胞免疫治疗是免疫治疗极其重要的组成部分。通过转基因方式表达嵌合抗原受体(ChimericalAntigen Receptor,CAR)的T/NK细胞，即CAR-T/CAR-NK是国际上最广泛应用的细胞类型,该类细胞能特异性地识别肿瘤细胞表面的靶点,进而被激活，特异性地杀伤靶细胞。

现有CAR-T细胞产品是向T细胞导入提供激活信号的CAR基因制备而成，只赋予T细胞简单地执行识别，激活，杀伤功能，产生严重的副作用。目前CAR-T识别的靶点为肿瘤相关抗原或某一细胞类型的特异性生物标志物，而这些靶点也会在正常细胞上表达，导致CAR-T细胞会靶向正常组织细胞，产生脱靶效应(on target off tumor)，造成致命的并发症。如CAIX-CART治疗转移性肾癌，结果靶向正常胆管细胞，引起胆管炎；Her2-CAR-T治疗转移性结直肠癌，结果靶向肺上皮细胞，引起肺水肿、呼吸衰竭；CD19-CAR-T治疗B细胞血液肿瘤，结果靶向正常B细胞，引起B细胞发育不良。

因此本领域迫切需要开放一种只对肿瘤细胞具有杀伤效果，而不杀伤正常细胞的安全型的嵌合抗原受体T细胞。

发明内容

本发明的目的是提供一种只对肿瘤细胞具有杀伤效果，而不杀伤正常细胞的安全型的嵌合抗原受体T细胞。

本发明第一方面提供了一种工程化免疫细胞，所述工程化免疫细胞包括表达靶向HLA结合域的第一CAR和靶向肿瘤抗原的第二CAR，

并且所述第一CAR的结构如式I所示：

L1-T1-Z1-Z2-TM1-C1 (I)

式中，

L1为任选的信号肽序列；

T1为HLA结合域,所述HLA结合域包括杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)的胞外段；

Z1为无或绞链区；

Z2为无或间隔物域(或间隔序列区)；

TM1为跨膜结构域；

C1为胞内T细胞抑制信号转导域；

所述第二CAR的结构如式II所示：

L2-T2-Z3-TM2-C2-CD3ζ (II)

式中，

L2为任选的信号肽序列；

T2为肿瘤抗原结合域；和

Z3为无或绞链区；

TM2为跨膜结构域；

C2为共刺激信号分子；

CD3ζ为源于CD3ζ的胞浆信号传导序列；

并且上述各式中，各“-”独立地为连接肽或肽键。

在另一优选例中，所述工程化免疫细胞还包括表达第三抗原结合域的第三CAR，所述第三抗原结合域选自下组：OPCML、HYAL2、DCC、SMAR1、E-cadherin、或其组合。

在另一优选例中，所述第三CAR具有式III所示的结构：

L3-T3-Z4-Z5-TM3-C3 (III)