[发明专利]一种安全型嵌合抗原受体T细胞及其用途

权利要求书

1.一种工程化免疫细胞，其特征在于，所述工程化免疫细胞包括表达靶向HLA结合域的第一CAR和靶向肿瘤抗原的第二CAR，

并且所述第一CAR的结构如式I所示：

L1-T1-Z1-Z2-TM1-C1 (I)

式中，

L1为任选的信号肽序列；

T1为HLA结合域,所述HLA结合域包括杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)的胞外段；

Z1为无或绞链区；

Z2为无或间隔物域(或间隔序列区)；

TM1为跨膜结构域；

C1为胞内T细胞抑制信号转导域；

所述第二CAR的结构如式II所示：

L2-T2-Z3-TM2-C2-CD3ζ (II)

式中，

L2为任选的信号肽序列；

T2为肿瘤抗原结合域；和

Z3为无或绞链区；

TM2为跨膜结构域；

C2为共刺激信号分子；

CD3ζ为源于CD3ζ的胞浆信号传导序列；

并且上述各式中，各“-”独立地为连接肽或肽键。

2.如权利要求1所述的工程化免疫细胞，其特征在于，所述工程化免疫细胞还包括表达第三抗原结合域的第三CAR，所述第三抗原结合域选自下组：OPCML、HYAL2、DCC、SMAR1、E-cadherin、或其组合。

3.如权利要求2所述的工程化免疫细胞，其特征在于，所述第三CAR具有式III所示的结构：

L3-T3-Z4-Z5-TM3-C3 (III)

式中，

L3为任选的信号肽序列；

T3为第三抗原结合域,所述第三抗原结合域选自下组：OPCML、HYAL2、DCC、SMAR1、E-cadherin、或其组合；

Z4为无或绞链区；

Z5为无或间隔物域；

TM3为跨膜结构域；

C3为胞内T细胞抑制信号转导域；

并且各“-”独立地为连接肽或肽键。

4.如权利要求1所述的工程化免疫细胞，其特征在于，所述HLA结合域包括HLA-C1结合域。

5.如权利要求1所述的工程化免疫细胞，其特征在于，所述HLA结合域包括杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)的KIR2DL2的胞外段。

6.一种制备工程化免疫细胞的方法，其特征在于，所述免疫细胞包括表达靶向HLA结合域的第一CAR和靶向肿瘤抗原的第二CAR，其中所述方法包括步骤：

向所述免疫细胞导入编码表达靶向HLA结合域的第一CAR的核酸序列和编码靶向肿瘤抗原的第二CAR的编码序列，从而获得工程化免疫细胞，其中所述第一CAR和第二CAR的结构如权利要求1中所定义。

7.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有权利要求1所述的工程化免疫细胞；以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

8.一种权利要求1所述的工程化免疫细胞的用途，其特征在于，用于制备选择性杀伤肿瘤细胞的药物或制剂。

9.一种用于选择性杀伤肿瘤细胞的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有容器，以及位于容器内的权利要求1所述的工程化免疫细胞。

10.一种选择性杀伤肿瘤细胞的方法，其特征在于，包括：

给需要治疗的对象施用安全有效量的权利要求1所述的工程化免疫细胞、或权利要求7所述的药物组合物。