[发明专利]叶酸检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及一种叶酸检测试剂盒及其制备方法。试剂盒包括第一试剂、第二试剂，可选地还包括标准品。第一试剂包含叶酸抗体和缓冲液，第二试剂包含包被结合有叶酸多聚半抗原的纳米颗粒和缓冲液。该试剂盒利用样本中的叶酸与第二试剂中的叶酸多聚半抗原竞争结合第一试剂中的叶酸抗体。样本中叶酸浓度越高，抗体与包被结合有叶酸多聚半抗原纳米颗粒反应产生浊度变化越小，由此可建立校准曲线，从而定量测定未知样本中叶酸浓度。

技术领域

本申请属于临床体外诊断及医学免疫学领域中，涉及一种免疫检测试剂，更进一步地，本申请涉及一种叶酸测定试剂盒。

背景技术

半抗原是指某些小分子物质，其单独不能诱导免疫应答，而不具备免疫原性。抗原能与对应抗体结合出现抗原-抗体反应，又不能单独激发人或动物体产生抗体的抗原。它只有免疫反应性，不具免疫原性，又称不完全抗原。大多数多糖、类脂都属于半抗原。

叶酸(Folic acid)是维生素B复合体之一，相当于蝶酰谷氨酸(pteroylglutamicacid，PGA)，是米切尔(H.K.Mitchell，1941)从菠菜叶中提取纯化的，故而命名为叶酸。叶酸有促进骨髓中幼细胞成熟的作用。人类如缺乏叶酸可引起巨红细胞性贫血以及白细胞减少症，对孕妇尤其重要。

叶酸具有以下几个生物学功能：(1)作为体内生化反应中一碳单位转移酶系的辅酶，起着一碳单位传递体的作用。(2)参与嘌呤和胸腺嘧啶的合成，进一步合成DNA和RNA。(3)参与氨基酸代谢，在甘氨酸与丝氨酸、组氨酸和谷氨酸、同型半胱氨酸与蛋氨酸之间的相互转化过程中充当载体。(4)参与血红蛋白及甲基化合物如肾上腺素、胆碱、肌酸等的合成。

叶酸是人体在利用糖分和氨基酸时的必要物质，是机体细胞生长和繁殖所必需的物质。在体内叶酸以四氢叶酸的形式起作用。四氢叶酸在体内参与嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的合成和转化。叶酸在制造核酸(核糖核酸、脱氧核糖核酸)上扮演重要的角色。叶酸帮助蛋白质的代谢，并与维生素B12共同促进红细胞的生成和成熟，是制造红血球不可缺少的物质。叶酸也作为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)及其它微生物的促进增殖因子而起作用。

叶酸对细胞的分裂生长及核酸、氨基酸、蛋白质的合成起着重要的作用。人体缺少叶酸可导致红血球的异常，未成熟细胞的增加，贫血以及白血球减少。叶酸是胎儿生长发育不可缺少的营养素。孕妇缺乏叶酸有可能导致胎儿出生时出现低体重、唇腭裂、心脏缺陷等。如果在怀孕头3个月内缺乏叶酸，可引起胎儿神经管发育缺陷，而导致畸形。因此，准备怀孕的女性，可在怀孕前就开始每天服用100微克到300微克叶酸。此外，叶酸还可以预防乳癌。常喝酒的女性(大约是每天一杯啤酒)会增高乳癌的发生率大约15％，但是如果能够经常地补充叶酸，这种危险就会下降45％。这个研究由哈佛大学针对88000名女性所做的长达10年的研究所发现，并且发表在新一期的美国医学会期刊中(The Journal of theAmerican Medical Association 1999；281：1632-1637)。

叶酸缺乏时，脱氧胸苷酸、嘌呤核苷酸的形式及氨基酸的互变受阻，细胞内DNA合成减少，细胞的分裂成熟发生障碍，引起巨幼红细胞性贫血。维生素B12和叶酸缺乏的临床表现基本相似，都可引起巨幼细胞性贫血、白细胞和血小板减少，以及消化道症状如食欲减退、腹胀、腹泻及舌炎等。以舌炎最为突出，舌质红、舌乳头萎缩、表面光滑，俗称“牛肉舌”，并伴有疼痛。

服用大剂量叶酸也可能产生毒性作用：(1)干扰抗惊厥药物的作用，诱发病人惊厥发作。(2)口服叶酸350mg可能影响锌的吸收，而导致锌缺乏，使胎儿发育迟缓，低出生体重儿增加。(3)掩盖维生素B12缺乏的早期表现，而导致神经系统受损害。

随着医疗专业人员和患者意识到叶酸缺乏的潜在健康风险，实验室检验量激增，需要我们提供更快、更准、更有效的检测方法，帮助医生和患者更早的得到检测结果。