[发明专利]一种磁珠时间分辨荧光免疫定量检测cTnI试剂盒

说明书

本发明公开了一种磁珠时间分辨荧光免疫定量检测cTnI试剂盒，包括包被cTnI单克隆抗体的免疫磁珠、cTnI校准品溶液、铕标记的cTnI单克隆抗体溶液、清洗液和增强液。所述的包被cTnI免疫磁珠为带有官能团修饰的直径1~3μm的超顺磁珠分别与cTnI单克隆抗体共价偶联物。本发明的灵敏度高，cTnI的灵敏度为0.05ng/mL，血清(血浆)样本不需要稀释；检测时间短，30min出报告；样品需求量少，一次上样只需100μL；配套全自动时间分辨免疫分析仪，操作简单，节省人力。

技术领域

本发明涉及体外试剂检测技术领域，具体地说，本发明涉及一种磁珠时间分辨荧光免疫定量检测cTnI试剂盒。

背景技术

肌钙蛋白是横纹肌收缩的调节蛋白，存在于心肌和骨骼肌中，由三种亚基组成，分别为TnI、TnC和TnT。三种亚基形成复合物，在肌肉收缩和舒张过程中起着重要调节作用。TnI为肌动蛋白的抑制亚基，有三种亚型：快骨骼肌亚型(fTnI)、慢骨骼肌亚型(sTnI)和心肌亚型(心肌肌钙蛋白I，cTnI)。其中心肌cTnI分子质量23.9kD，包含有210个氨基酸残基。cTnI含量升高可作为诊断急性心梗(acute myocardial infarction，AMI)的重要血清学指标。

急性心梗近年来在世界范围内发病持续升高，而对AMI的治疗，再灌注治疗的效果与时间呈显著负相关，早期发现AMI对及时、正确治疗非常关键。目前常用诊断AMI的生化指标有肌红蛋白(myoglobin，MYO)、肌钙蛋白(troponin I，cTnI或troponin T，cTnT)和肌酸激酶同工酶(creatine kinasemass，CK-MB)。其中MYO半衰期短，峰值到达早，但是特异性差容易受到干扰，得到假阳性的检查结果；CK-MB特异性比较好，但是半衰期相对MYO长，需要更长的时间才能反馈病情，延迟医生的诊断和治疗。cTnI是目前诊断心肌梗死的金标准，目前检测cTnI的方法主要要胶体金法、荧光免疫层析法，但是这些方法普遍存在灵敏度低，准确度差等缺点；化学发光法虽灵敏度高，但检测时间长。对于AMI患者来讲，时间就是生命，为了实现对胸痛患者的早期识别并进行危险分层，我们需要更快提供准确结果的检测仪器和检测方法。

为此，本发明将时间分辨荧光免疫分析技术与磁微粒相结合，提供了一种基于磁微粒的时间分辨荧光免疫分析试剂盒及其制备方法和检测方法，能够检测样品中cTnI含量，检测结果更加准确可靠，具有更高的检测灵敏度和特异性，并达到了较佳的性能参数。将大大提高AMI诊断率，在AMI早期诊断、疗效观察和预后判断中发挥越来越重要的作用。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种成本低廉、操作简单、准确、灵敏的磁珠时间分辨荧光免疫定量检测cTnI试剂盒。

为实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种磁珠时间分辨荧光免疫定量检测cTnI试剂盒，包括包被cTnI单克隆抗体的免疫磁珠、cTnI校准品溶液、铕标记的cTnI单克隆抗体溶液、清洗液和增强液。

在上述磁珠时间分辨荧光免疫定量检测cTnI试剂盒中，所述的包被cTnI免疫磁珠为带有官能团修饰的直径1～3μm的超顺磁珠分别与cTnI单克隆抗体共价偶联物，其中所使用的磁珠为羧基磁珠、氨基磁珠、羟基磁珠、甲苯磺酰基磁珠、NHS磁珠、链酶亲和素磁珠、蛋白A磁珠、蛋白G磁珠、抗小鼠IgG磁珠、亲水磁珠、疏水磁珠中的一种或几种。