[发明专利]一种融合蛋白及治疗非小细胞肺癌的重组病毒疫苗和制备方法

权利要求书

1.一种融合蛋白，其特征在于，由黏蛋白1抗原元件、连接肽和黑素瘤抗原家族A3抗原元件组成；

所述黏蛋白1抗原元件和黑素瘤抗原家族A3抗原元件之间为连接肽；所述连接肽的氨基酸个数为0～20个；

所述黏蛋白1抗原元件的氨基酸序列如序列表中SEQ ID No.1所示；所述黑素瘤抗原家族A3抗原元件的氨基酸序列如序列表中SEQ ID No.2所示。

2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列如序列表中SEQ ID No.4所示。

3.一种融合蛋白的编码基因，其特征在于，编码权利要求1所述的融合蛋白。

4.一种治疗非小细胞肺癌的重组病毒疫苗的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将权利要求3所述的编码基因克隆到穿梭质粒中，得到重组穿梭质粒；

2)用MVA病毒感染细胞，培养90～120min，得到感染细胞；

3)将所述重组穿梭质粒与所述感染细胞混合，37℃培养24～48h，得到单层细胞；

4)反复冻融所述单层细胞2～3次，将冻融的细胞破碎处理2～5次，固液分离，得到上清液；

5)将所述上清液接种细胞，培养，将得到的病变细胞破碎、分离上清液，得到用于治疗非小细胞肺癌的重组病毒疫苗。

5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述步骤2)中培养的时间为100min。

6.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述步骤1)的穿梭质粒为pIIIdHRP7.5。

7.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述步骤3)中培养的时间为36h。

8.权利要求4～7任意一项所述的构建方法得到的重组病毒疫苗，其特征在于，包括权利要求3所述的融合蛋白的编码基因。