[发明专利]鼻咽癌抗体检测试剂、其制备方法及鼻咽癌检测试剂盒

说明书

本发明提供了一种鼻咽癌抗体检测试剂、其制备方法及鼻咽癌检测试剂盒。其中鼻咽癌抗体检测试剂包括EBV抗原，EBV抗原选自EA‑D P54、EA‑D P138、VCA P18、VCA P23、NA1、ZTA及RTA中的至少三个抗原。通过选取EA‑D P54、EA‑D P138、VCA P18、VCA P23、NA1、ZTA及RTA中的至少三个抗原的优势片段，同时利用至少三种抗原的特异性片段对鼻咽癌抗体进行检测，相比现有采用单一抗原进行分别检测不仅具有检测效率高的优势，而且还具有检测灵敏度高和特异性高的优势。

技术领域

本发明涉及鼻咽癌检测领域，具体而言，涉及一种鼻咽癌抗体检测试剂、其制备方法及鼻咽癌检测试剂盒。

背景技术

EB病毒(Epstein-Barr Virus，EBV)是一种γ疱疹病毒，基因组全长184kb。目前已有令人信服的证据支持EB病毒是鼻咽癌重要的致病因子，参与鼻咽癌的多阶段、多因素的发生过程。EB病毒在人群中的感染率达到90％以上，与多种人类疾病相关，如传染性单核细胞增多症、鼻咽癌等。被病毒感染的细胞具有EBV的基因组，并可产生各种抗原及相应的抗体。

鼻咽癌在我国东南地区是一种常见恶性肿瘤，其发生被证实与EB病毒感染密切相关，鼻咽癌组织中往往可以检测到EBV的存在。国内外对EB病毒作了大量研究均发现抗EB病毒抗原的免疫球蛋白对鼻咽癌诊断有特异性。

常用于鼻咽癌筛查的血清学指标有EBV EA IgA、EBV EA IgG、EBV VCA IgA、EBVNA IgA等，另外，有研究表明EBV MA IgA、EBV ZTA IgA、EBV RTA IgA、EBV ZTA IgG、EBVRTA IgG等也可用于鼻咽癌的辅助筛查。

EB病毒在细胞中的生活周期可分为潜伏期、立即早期、早期、病毒DNA复制期和晚期。EBV基因组的不同片段编码的特异性病毒抗原可分为两类：(1)病毒潜伏感染时表达的抗原。当EB病毒感染后，大部分病毒都处于潜伏状态，处于这种状态下的病毒表达大约10种病毒蛋白，主要有EB NA1(EBV核抗原1)、EB NA2、EB NA3A、EB NA3B、EB NA3C、EB NALP、LMP1(EBV潜伏膜蛋白1)、LMP2A、LMP2B等。(2)与病毒增殖周期相关的抗原。在病毒增殖开始时产生EBV早期抗原(EA)，EA是病毒增殖期诱导的非结构蛋白，可分弥散性早期抗原(EA-D)和局限性早期抗原(EA-R)，EA-D和EA-R都不是由单一的抗原构成的，而是由多种抗原构成的复合物。随着EB病毒早期抗原的积累，病毒的DNA开始复制。病毒的晚期蛋白主要有EBV病毒壳抗原(virus capsid antigen，VCA)和EBV膜抗原(membrane antigen，MA)。

Zta蛋白属于立即早期反式激活因子，是调节病毒从潜伏期进入复制状态的关键，Zta一开始表达病毒就进入复制的链式反应过程。Zta-IgA的出现，表明病毒已经被激活进入溶解性感染期。

Rta是EB病毒刚刚进入裂解复制状态时就表达的立即早期基因BRLF1的编码转录激活蛋白，是EB病毒进入裂解复制状态必需的激活元件而且仅在鼻咽癌发生时表达，对诊断鼻咽癌具有极高的特异性。

目前国内外报道的用于筛查鼻咽癌的试剂主要有EBV EA IgA、EBV EA IgG、EBVVCA IgA、EBV NA IgA、EBV MA IgA、EBV Zta IgA、EBV Zta IgG、EBV Rta IgA、EBV Rta IgG等。但是这些检测试剂都是单一指标，在筛查鼻咽癌时意义不大，灵敏度和特异性都较低。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种鼻咽癌抗体检测试剂、其制备方法及鼻咽癌检测试剂盒，以解决现有技术中的鼻咽癌检测存在灵敏度低的问题。