[发明专利]联合检测多种心脏生物标志物的方法及其试剂盒

权利要求书

1.一种联合检测多种心脏生物标志物的试剂盒，其特征在于，包括融血试剂、微球试剂和荧光试剂，

所述融血试剂中含有表面活性剂；

所述微球试剂包括直径不同的N种微球，所述N种微球上分别对应偶联N种心脏生物标志物的第一单克隆抗体，且所述第一单克隆抗体上标记有生物素，其中，N的取值范围为2～10的正整数；

所述荧光试剂包括所述N种心脏生物标志物的第二单克隆抗体，所述第二单克隆抗体上标记有荧光素，且所述第一单克隆抗体、所述第二单克隆抗体与抗原的结合位点不同。

2.如权利要求1所述的联合检测多种心脏生物标志物的试剂盒，其特征在于，所述微球选自链霉素、羟基或氨基修饰的高分子微球，链霉素、羟基或氨基修饰的金属微球中的一种。

3.如权利要求1所述的联合检测多种心脏生物标志物的试剂盒，其特征在于，所述N的取值范围为2～6的正整数，且所述心脏生物标志物选自cTnI、NT-proBNP、cTnT、CK-MB、BNP、Myo。

4.如权利要求1-3任一项所述的联合检测多种心脏生物标志物的试剂盒，其特征在于，所述融血试剂包括融血试剂浓缩液和融血试剂稀释液，且所述融血试剂浓缩液和所述融血试剂稀释液的体积比为(1:20)～(1:5)。

5.如权利要求4所述的联合检测多种心脏生物标志物的试剂盒，其特征在于，以所述融血试剂浓缩液的总重量为100％计，所述融血试剂浓缩液包括质量百分含量如下的下列组分：

6.如权利要求5所述的联合检测多种心脏生物标志物的试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂为十二烷基硫酸钠，所述防腐剂为Proclin300。

7.一种联合检测多种心脏生物标志物的方法，其特征在于，至少包括以下步骤：

提供全血样本、血清样本和如权利要求1-6任一项所述联合检测多种心脏生物标志物的试剂盒；

在所述血清样本中加入与所述N种心脏生物标志物对应的N种商业抗原，配置成梯度浓度的工作标准溶液，获取N种心脏生物标志物的浓度-荧光强度标准曲线；

在所述全血样本中加入融血试剂，进行融血孵育处理，得到融血样本；在所述融血样本中加入微球试剂和荧光试剂，经免疫反应获得待测样本；在与所述工作标准品相同的检测条件下，采用悬浮阵列荧光免疫分析仪对所述待测样本进行检测，将检测结果与所述浓度-荧光标准曲线进行比对，获得N种心脏生物标志物的浓度。

8.如权利要求7所述的联合检测多种心脏生物标志物的方法，其特征在于，在所述融血样本中加入微球试剂和荧光试剂，经免疫反应获得待测样本的步骤中，所述微球试剂和所述荧光试剂的体积比为1:1，所述免疫反应的条件为37℃条件下恒温孵育2-15min。

9.如权利要求7所述的联合检测多种心脏生物标志物的方法，其特征在于，在所述全血样本中加入融血试剂，进行融血孵育处理的步骤，包括：采用所述融血试剂将所述全血样本稀释10-30倍，在37℃条件下恒温孵育1-5min。

10.如权利要求7-9任一项所述的联合检测多种心脏生物标志物的方法，其特征在于，在所述血清样本中加入与所述N种心脏生物标志物对应的N种商业抗原，配置成梯度浓度的工作标准溶液后，还包括；采用悬浮阵列荧光免疫分析仪对所述工作标准溶液进行检测，获取N种心脏生物标志物的相对浓度-荧光标准曲线；采用人血清为基质的标准品标准品对所述相对浓度-荧光标准曲线进行定标，分别获得N种心脏生物标志物的浓度-荧光标准曲线。