[发明专利]抗轮状病毒感染的真核细胞膜包覆仿生纳米粒及其制备方法

权利要求书

1.抗轮状病毒感染的细胞膜仿生纳米粒，所述细胞膜仿生纳米粒由外壳和所述外壳包覆的内核组成，所述外壳为真核细胞膜，所述内核为介孔二氧化硅纳米粒，所述真核细胞膜为Caco-2细胞膜或MDCK细胞膜；所述细胞膜仿生纳米粒的粒径为80-120nm、90-96nm或93-95nm；所述细胞膜仿生纳米粒的粒径多分散系数为≤0.3、≤0.25或≤0.2。

2.根据权利要求1所述的细胞膜仿生纳米粒，其特征在于：所述细胞膜仿生纳米粒的Zeta电位为0至-20mV。

3.根据权利要求2所述的细胞膜仿生纳米粒，其特征在于：所述细胞膜仿生纳米粒的Zeta电位为0至-12mV。

4.根据权利要求3所述的细胞膜仿生纳米粒，其特征在于：所述细胞膜仿生纳米粒的Zeta电位为-10至-11mV。

5.根据权利要求1-4中任一所述的细胞膜仿生纳米粒，其特征在于：所述细胞膜仿生纳米粒按照包括如下步骤的方法制备：用真核细胞制备真核细胞膜小体，用所述真核细胞膜小体包覆介孔二氧化硅纳米粒，得到细胞膜仿生纳米粒；所述真核细胞为Caco-2细胞或MDCK细胞。

6.根据权利要求5所述的细胞膜仿生纳米粒，其特征在于：所述制备真核细胞膜小体包括：1)用细胞裂解液在4℃裂解所述真核细胞2.5小时，然后进行匀浆破碎细胞，再离心收集沉淀，得到所述真核细胞膜；2)将所述真核细胞膜进行功率为50W和频率为20-25KHz的超声波处理1分钟，用脂质体挤出器采用孔径为100-400nm、200-400nm或200nm的滤膜，在0.3Mpa的挤出压力下挤出，得到所述真核细胞膜小体。

7.根据权利要求6所述的细胞膜仿生纳米粒，其特征在于：所述离心收集沉淀包括：先以500g离心5min收集上清液，将该上清液命名为上清液1；对所述上清液1采用10000g离心5min收集上清液，将该上清液命名为上清液2；对所述上清液2进行100000g离心1h，收集沉淀，所述沉淀为所述真核细胞膜。

8.根据权利要求6所述的细胞膜仿生纳米粒，其特征在于：用所述真核细胞膜小体包覆介孔二氧化硅纳米粒包括将所述真核细胞膜小体与介孔二氧化硅纳米粒进行功率为80W和频率为20-25KHz的超声波处理2分钟，用脂质体挤出器采用孔径为100-400nm、200-400nm或200nm的滤膜，在0.3Mpa的挤出压力下挤出，得到细胞膜仿生纳米粒。

9.制备权利要求1-4中任一所述的细胞膜仿生纳米粒的方法，包括用真核细胞制备真核细胞膜小体，用所述真核细胞膜小体包覆介孔二氧化硅纳米粒，得到细胞膜仿生纳米粒；所述真核细胞为Caco-2细胞或MDCK细胞。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：所述制备真核细胞膜小体包括：1)用细胞裂解液在4℃裂解所述真核细胞2.5小时，然后进行匀浆破碎细胞，再离心收集沉淀，得到所述真核细胞膜；2)将所述真核细胞膜进行功率为50W和频率为20-25KHz的超声波处理1分钟，用脂质体挤出器采用孔径为100-400nm、200-400nm或200nm的滤膜，在0.3Mpa的挤出压力下挤出，得到所述真核细胞膜小体。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于：所述离心收集沉淀包括：先以500g离心5min收集上清液，将该上清液命名为上清液1；对所述上清液1采用10000g离心5min收集上清液，将该上清液命名为上清液2；对所述上清液2进行100000g离心1h，收集沉淀，所述沉淀为所述真核细胞膜。