[发明专利]一种青枯病菌噬菌体微生态制剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种青枯病菌噬菌体微生态制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将青枯病菌液接入发酵培养基中培养，得到宿主发酵液；青枯病菌在发酵培养基中初始菌体浓度为10⁸～10¹⁴CFU/ml；

2)将浓度为10¹⁰～10¹⁴PFU/ml的青枯病菌噬菌体液接种至所述宿主发酵液中发酵培养；青枯病菌噬菌体液的接种量为1％～10％；

3)所述步骤2)中发酵培养进行至8～20h时，向所述步骤2)中的宿主发酵液中流加青枯病菌液，继续发酵培养，控制整个发酵周期为24～48h，得到发酵液，所述青枯病菌液的流加体积为宿主发酵液体积的1％～10％，青枯病菌液的浓度为10¹⁰～10¹⁴PFU/ml；

4)将所述步骤3)中得到的发酵液进行灭活青枯病菌宿主，得到青枯病菌噬菌体微生态制剂。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中每小时流加青枯病菌液的体积为宿主发酵液体积的0.7％～10％。

3.根据权利要求1～2任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中青枯病菌液的流加时间为6～12h。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中发酵培养基包括以下含量组分：蛋白胨5～15g/L、牛肉浸粉1～10g/L和氯化钠1～10g/L；所述发酵培养基的pH值为6.5～8.0。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)和步骤3)中的发酵培养条件独立如下：发酵温度为25～32℃，宿主发酵液的pH值维持6～9；发酵在搅拌条件下进行，搅拌转速为50～200rpm。

6.根据权利要求1～2、4和5任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中灭活的方法为水浴；水浴的温度为45～70℃；水浴的时间为2～5h。

7.权利要求1～6任意一项所述方法制备的青枯病菌噬菌体微生态制剂，其特征在于，青枯病菌噬菌体的效价为10¹³～10¹⁶PFU/ml。

8.权利要求7所述的青枯病菌噬菌体微生态制剂在植物保护中鉴定或检测青枯病菌中的应用。