[发明专利]一种外泌体的制备方法以及由该方法制备的外泌体和用途

权利要求书

1.一种制备外泌体的方法，该方法包括以下步骤：1）采集人脂肪组织，并提取得到脂肪干细胞：2）对步骤1）中得到的脂肪干细胞进行处理，以提取得到外泌体；

其中，步骤1）包括：采集人脂肪组织，剔除脂肪中肉眼可见的血管和纤维部分，剪碎，并通过生理盐水洗涤，去除残留血液，完成洗涤后，加入脂肪组织体积的0.2-0.4％(g/mL)胶原酶Ⅰ、脂肪组织体积的0.007-0.01％(g/mL)酶活力促进剂、脂肪组织体积3-7％(g/mL)的壳聚糖水凝胶，在37℃温度条件下均匀震荡消化40-80分钟后过滤，最后将滤液以1000-2000转/分钟离心5-10分钟，弃去上清，由此获得脂肪干细胞；

其中，步骤2）包括：对上述得到的脂肪干细胞或脂肪干细胞培养液混合物进行提取分离以得到外泌体；

所述壳聚糖水凝胶的制备方法为：将5-15重量份水溶性壳聚糖、2-5重量份羟乙基纤维素和0.2-0.6重量份氯化钠加入95-105重量份水中混合均匀即得；

所述酶活力促进剂由75-85wt%L-天门冬氨酸钙和15-25wt%乳糖酸钙组成。

2.根据权利要求1所述的制备外泌体的方法，其中，步骤1）进一步包括：将得到的脂肪干细胞通过干细胞培养基接种于培养瓶，37℃、5%CO₂细胞培养箱中培养不少于48h，以得到脂肪干细胞培养液混合物。