[发明专利]一种三价卵黄抗体口服液的制备方法

权利要求书

1.一种三价卵黄抗体口服液的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）选取无特定病原体蛋鸡在洁净养殖场隔离饲养，对蛋鸡进行3次免疫，每次给每只鸡注射小鹅瘟、番鸭细小、鸭大舌病三价疫苗注射剂量分别为（0.6-0.8mL）、（1.0-1.4mL）、（2.2-2.6mL），每次间隔15天；

（2）完成第3次免疫21天后，收集鸡蛋，对卵黄中的卵黄抗体进行免疫学检测，小鹅瘟、番鸭细小、鸭大舌病的卵黄抗体琼脂扩散效价达到1:16以上的鸡蛋为小鹅瘟、番鸭细小、鸭大舌病病毒高免鸡蛋，收集贮存在16℃条件下备用；

（3）将步骤（2）所得高免蛋用0.2%的碘液消毒10min，打碎，取出卵黄，加入卵黄重量6-8倍的蒸馏水，并调整pH值至5.2-5.8，搅拌15-25分钟，在6℃条件下，静置8-14小时，调整离心机转速为3000-4000r/min，离心10-20分钟，取上清液，备用；

（4）将步骤（3）所得上清液加入灭菌的容器中，用无菌生理盐水稀释0.5-0.8倍，再加入与上清液等体积的氯仿-甲醇混合溶液，其中氯仿和甲醇的体积比为10:1，充分震荡后，于28-36℃水浴40-60分钟，其间搅拌3-5次，取出，于1500-2500r/min转速下离心25-35分钟，样品分三层，最上层溶液为卵黄抗体水溶液，取出，备用；

（5）将卵黄抗体水溶液进行微孔过滤，然后依次加入pH6.6的PBS液和硫柳汞，其中卵黄抗体水溶液：PBS液：硫柳汞的体积比为（0.7-0.9）：（0.04-0.06）：（0.001-0.002），混匀，用蜡密封，置于4℃冷藏保存，即得。

2.根据权利要求1所述的三价卵黄抗体口服液的制备方法，其特征在于，步骤（3）加入卵黄重量7倍的蒸馏水。

3.根据权利要求1所述的三价卵黄抗体口服液的制备方法，其特征在于，步骤（3）调整pH值至5.5。

4.根据权利要求1所述的三价卵黄抗体口服液的制备方法，其特征在于，步骤（4）用无菌生理盐水稀释0.7倍。

5.根据权利要求1所述的三价卵黄抗体口服液的制备方法，其特征在于，步骤（4）于32℃水浴50分钟。

6.根据权利要求1所述的三价卵黄抗体口服液的制备方法，其特征在于，步骤（4）于2000r/min转速下离心30分钟。