[发明专利]一种用于鉴定弓形虫的LAMP引物组合及其应用

权利要求书

1.引物组合，包括引物F3、引物B3、引物FIP、引物BIP、引物LF和引物LB；

所述引物F3为如下(a1)或(a2)：

(a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子；

(a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子；

所述引物B3为如下(a3)或(a4)：

(a3)序列表的序列2所示的单链DNA分子；

(a4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子；

所述引物FIP为如下(a5)或(a6)：

(a5)序列表的序列3所示的单链DNA分子；

(a6)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子；

所述引物BIP为如下(a7)或(a8)：

(a7)序列表的序列4所示的单链DNA分子；

(a8)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子；

所述引物LF为如下(a9)或(a10)：

(a9)序列表的序列5所示的单链DNA分子；

(a10)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同功能的DNA分子；

所述引物LB为如下(a11)或(a12)：

(a11)序列表的序列6所示的单链DNA分子；

(a12)将序列6经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列6具有相同功能的DNA分子。

2.如权利要求1所述的引物组合，其特征在于：所述引物组合由所述引物F3、所述引物B3、所述引物FIP、所述引物BIP、所述引物LF和所述引物LB组成。

3.权利要求1或2所述引物组合的应用，为(b1)或(b2)：

(b1)鉴定弓形虫；

(b2)制备用于鉴定弓形虫的试剂盒。

4.权利要求1或2所述引物组合的应用，为(b3)或(b4)：

(b3)鉴定待测寄生虫是否为弓形虫；

(b4)制备用于鉴定待测寄生虫是否为弓形虫的试剂盒。

5.权利要求1或2所述引物组合的应用，为(b5)或(b6)：

(b5)检测待测样本是否感染了弓形虫；

(b6)制备用于检测待测样本是否感染了弓形虫的试剂盒。

6.含有权利要求1或2所述引物组合的试剂盒；所述试剂盒的用途为(b1)或(b3)或(b5)：

(b1)鉴定弓形虫；

(b3)鉴定待测寄生虫是否为弓形虫；

(b5)检测待测样本是否感染了弓形虫。

7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还含有重组质粒；所述重组质粒为向pGEM-T Easy Vector的限制性内切酶ApaⅠ和SacⅠ之间插入序列表中序列7所示的双链DNA分子得到的。

8.权利要求6或7所述试剂盒的制备方法，包括将各条引物单独包装的步骤。

9.一种鉴定待测寄生虫是否为弓形虫的方法，包括如下步骤：

(1)提取待测寄生虫的基因组DNA；

(2)以步骤(1)提取的基因组DNA为模板，采用权利要求1或2所述引物组合进行环介导等温扩增，然后进行如下判断：

如果采用所述引物组合可以实现以所述基因组DNA为模板的特异性扩增，待测寄生虫为或候选为弓形虫；如果采用所述引物组合不可以实现以所述基因组DNA为模板的特异性扩增，待测寄生虫不为或候选不为弓形虫。

10.一种检测待测样本是否感染了弓形虫的方法，包括如下步骤：

(1)提取待测样本的总DNA；

(2)以步骤(1)提取的总DNA为模板，采用权利要求1或2所述引物组合进行环介导等温扩增，然后进行如下判断：

如果采用所述引物组合可以实现以所述总DNA为模板的特异性扩增，待测样本感染了或疑似感染了弓形虫；如果采用所述引物组合不可以实现以所述总DNA为模板的特异性扩增，待测样本未感染或疑似未感染弓形虫。